鸡p15因子抑制MDCC—MSB1细胞的增殖及端粒酶活性.pdfVIP

1296 中国兽医学报 2008年l1月 第28卷 第 11期 ChinJVetSciNov．2008 Vo1．28 No．11 鸡 p15因子抑制MDCC—MSB1细胞的增殖及端粒酶活性 艾永兴 ，邹亚学 ，潘风光 ，郝军元 ，张玉静 (1．吉林大学 畜牧兽医学院，吉林长春 130062；2．河北科 技师范学院 生命科学系，河北 秦皇岛066000) 摘要 ：为探讨鸡 p15基 因的生物学功能，试验构建 了鸡 p15基 因的真核表达载体 pcDNA3．1(+)一p15，并转染到鸡 MDV转化的淋巴细胞 系MDCC-MSB1，应用G418筛选掉未转染的细胞，对存活细胞 p15蛋 白的表达、细胞增殖 力、群体倍增时间、细胞周期和端粒酶的活性进行 了检测。结果表 明，与转染空质粒 pcDNA3．1(+)细胞相 比，转染 了p15基 因的细胞稳定表达 了p15蛋 白；细胞 的增殖受到了抑制 ，抑制率达 45 ～74 ；群体倍增时间从 27h延 长至416h；流式细胞仪分析细胞周期发现 ，p15蛋 白引起 了细胞多停滞于G0／G1期 ，S和 G2／M 期细胞 比例下降； 端粒酶活性受到抑制。 关键词 ：pl5；MDCC-MSB1；细胞增殖 ；端粒酶活性 中图分类号 ：$852．2；Q78 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—4545(2008)l1—1296—05 overexpressi0nofchickenp15cansuppresstheproliferationandtelomerase activity0fMDCC-MSB1 · AIYong—xing，ZOU Ya—xue。，PANFeng—guang，HAOJun—yuan，ZHANGYu—jing (1．Collegeof AnimalScienceandVeterinaryMedicine，JilinUniversity，Changchun130062，China；2．LifeSci— enceDepartment。HebeiNormalUniversity of Science ＆ Technology，Qinhuangdao，Hebei 066000．China) Abstract：To study thebiofunctionofp15，recombinanteukaryon expression vectorpcDNA3．1(+ )一pl5was constructedandtransfectedinto MDCC—MSB1，achickenlymphoblastoidceilslinetransformedbyMarekSdisease virus．TheuntransfectedcellswereeliminatedbyG418．Thetransfectedcellswerecollectedtotesttheexpressionof p15protein，theproliferationability，populationdoublingtime，cellcyclephasesandtelomeraseactivity．Incontrastto thecellstransfectedwithpcDNA3．1(+)，thecellstransfectedwithpcDNA3．1(+ )一p15stablyexpressedp15pro— teinevenuntil144haftertransfeetion．pl5proteininduceMDCC—MSB1cellproliferationinhibitiofiwiththeinhibi— tionratiotoberangedfrom 45to74percent．PopulationdoublingtimeofcellstransfectedwithpcDNA3．1(+ )一p15 weredelayedfrom 27hto416h．CellcyclephaseswasanalyzedbyFlow Cytometry．p15proteinarrestedMDCC— MSB1；nG0／G1phase。decreasedtheratioofcellsinSand