鸡降钙素基因克隆及其真核表达质粒的构建.pdfVIP

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维普资讯 动物医学进展 。2008,29(5):49—54 ProgressinVeterinaryM edicine 鸡降钙素基 因克隆及其真核表达质粒的构建 俞 路 ,王雅倩 ,章世元 , 卜祥斌 ,李治学 , (扬州大学动物科学与技术学院 江苏扬州 225009) 摘 要 :采集 200 日龄新扬州产蛋鸡腮后腺组织,直接提取总 RNA,进行反转录一聚合酶链反应 (RT- PCR),扩增产物进行克隆、测序,获得新扬州鸡降钙素(CT)基 因序列。测序表 明,CT基因核苷酸长度为 417bp,编码 139个氨基酸。与GenBank上发表序列相 比较,核苷酸同源性为 99.8 ,在第 135位处存在 G —C的有义突变。与从 GenBank下载读取的红点鲑、大马哈鱼、河豚 、斑马鱼、人、家鼠、绵羊、犬8个物秫序 列进行比较分析 ,核苷酸 同源性分别为 74.0 、63.3 、59.5 、55.6 、52.8 、5O.6 、48 及 42.2 。将 该基因片段克隆到真核表达载体 pCEP4,构建重组质粒 pCEP4一CT,所获重组质粒经过酶切 、测序鉴定,证实 含有 目的片段且连接、构建as_确,为利用 pCEP4一CT调控机体骨钙代谢、防治蛋鸡骨质疏松症的研究和应用 奠定 了基础 。 关键词:鸡;降钙素;基因克隆;表达载体 中图分类号:$858.31;$859.793 文献标识码 :A 文章编号:10O7—5O38(20o8)O5—0O49一O6 我国是世界蛋鸡养殖大国,近年来商品代蛋鸡 3O9,6[2],严重影响蛋鸡生产性能。如何调控蛋鸡钙 占世界存栏量的4O ~45 ,且逐渐增加。2005年 磷代谢,预防CLO,延长笼养蛋鸡的产蛋周期,提高 我国蛋鸡存栏 2O亿只,年人均鸡蛋占有量21.8 , 其产蛋性能是当前蛋鸡养殖业所面临的重要课题之 [3] 一 占世界第 3位,是世界平均水平的2.1倍口]。伴随 。 传统营养学多采用适当提高 日粮中钙、磷含 产业化进程的加快,笼养蛋鸡营养代谢病发病率也 量,调整钙磷 比例和添加维生素 D。等方法防治 呈升高趋势,骨质疏松症便是其 中一种。笼养蛋鸡 CLO,但效果甚微 。因此,通过调控产蛋鸡相关激素 骨质疏松症 (Cagelayerosteoporosis,CLO)又称为 或因子水平调控蛋鸡钙、磷代谢,预防和治疗 CLO 笼养蛋鸡疲劳症 (Fatigueofcagelayers),是蛋鸡养 是近年来营养和生理研究的一个重要内容[5]。 殖业中最严重的骨骼代谢疾病 ,发病率高达 16 ~ 收稿 日期 :2008—03—05 作者简介 :俞 ~ (1983--),男,山东滕州人,硕士研究生,主要从事饲料资源开发利用研究。*通讯作者 Isolation andIdentification ofBrucella from thePathologicMaterialsof DairyCowsinin HuhhotCityandtheSurroundingAreas YA0Jing ,XIEYing-bo ,WU Ri-han~,TEMUERBa-gen2 MA Li-feng~,LIRui-gang~,YU Fu—liZ,SHEN Zhi-yi,LIPing-an (1.InnerMongoliaAgricult

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