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的潜在指标。
参考文献(略)
RNA：F扰在抗硼V1感染中的应用
浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室(310003)吴海波吴南屏
RNA干扰(RNA
性mRNA，导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型缺失的现象。1998年FireA等人首次发现并命
名，该技术目前已成功用于基因功能和信号转导系统上下游分子相互关系的研究，在生命科学领域的开
(FireA，Xu
创性意义和极大的应用前景，该技术的两位发现者也因此而荣获2006年诺贝尔医学奖。
in
MK，eta1．Potentand interferencedouble-strandedRNA
S，Montgomery specificgenetic by
elegans．Nature．1998，391(6669)：806-11．)
一、RNAi的基本特点
RNA干扰是属于转录后的基因沉默机制(post．transcriptionalgene
地降解具有序列相应的单个内源或外源基因的mRNA，抑制基因表达的效率很高。相对少量的dsRNA就可
以使表型达到缺失突变体程度。
III)
RNA
两个游离未配对的核苷酸。2、效应阶段：siRNA和解螺旋酶、内切核酸酶等结合形成RNA诱导的沉默复
合物RISC(RNA．mducedsilencing
的sil矾A则又可以进入下一轮循环而达到数量扩增的目的，进一步放大I冰Ai作用，显著增加了对基因表
GJ．Roleforabidentateribonucleasein
达的抑制效果。(BernsteinAA，HammondSM，Hannon
E，Caudy
T，Fleenor
theinitiation J，SimmerF，
st印ofRNA
RNA l，1
eta1．Ontheroleof in 07(4)：465．76．)
amplificationdsRNA．triggeredgenesilencing．Cell．200
·214·
在细胞中表达。前面3种方法包括体外制备siRNAs然后经过转染或者电转导入哺乳动物细胞，适用于筛选
或者表达框转染到细胞中，能够在宿主细胞中生成siRNAs，其中，逆转录病毒用于siRNA表达，具有转
染效率高，能够维持较长时间的基因沉默的特点。由于RNA干扰技术的诸多优点，RAN干扰技术及其应
用已经成为分子生物学领域的研究热点，成为抗肿瘤，抗病毒药物研究和治疗的热点。目前，RAN干扰
在人类抗HIV-1感染研究中也得到了充分应用，并已取得阶段性的进展，为人类探索艾滋病的治疗带来新
的希望。
二、RNA干扰阻止HIV感染
1．宿主基因靶点
HIV-1感染细胞是艾滋病病程的第一个环节，因此预防HIV-I的进入对细胞具有真正的保护作用。
这些表面受体的簇集激活79p41，从而形成复合物以介导病毒包膜和靶细胞的结合。由于HIV存在许多
差异且易产生突变，所以设计高度特异性的siRNA有一定难度，但抑制基本的HIV细胞受体或辅助受体比
病毒的靶目标更容易。NovinaCD等用化学合成法制备了针对宿主细胞CD4mRNA的siRNA，转染能表达
mRNA含量减少了8倍，相应的HIV-I感
人CD4抗原的Magi细胞，3天后通过Northern印迹检测．发现CD4
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