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RP_HPLC法快速测定人血浆中的氯诺昔康 葛庆华1。周臻1，支晓瑾1，马丽丽2(1．上海医药工业研究院药物制荆国家工程研究中心，上海201203；2．通标捉硅挂，陋务有限公 司，上海200233) 2．3血样前处理 氯诺昔康(I砌0xic锄，c，，H。。ClM04S2)为非甾 体类抗炎镇痛药，系噻嗪类衍生物，具有较强的镇痛 精密吸取血浆250¨工，置1．5mL塑料离心管 和抗炎作用．临床用于治疗急性轻度至中度疼痛和 中，加25％高氯酸乙腈溶液100斗L，漩涡振荡3 000 由某些类型的风湿性疾病引起的关节疼痛和炎症。 min，离心lOmin(13r·min。)，取上清液迸样。 有关生物样品中氯诺昔康的含量测定方法有HPLc2．4血药浓度测定方法专属性试验 【”1和Lc．Ms¨】。这些方法在进样前都需采取液一 取受试者空白血浆按血样处理项下操作，色谱 液萃取∞1或圃相莘取瞌1的样品浓缩、提取过程，消 图见图1A，空白血浆加氯诺昔康(300雌·L“)的 h后的色谱图 耗大量的人力、物力，耗时长、成本高，此外，由于操 谱图见图1B，受试者日服受试制剂3 作步骤多还易引入操作误差。本试验根据氯诺昔康 见图1c。由图可见在此条件下。本法分离效果良 的化学特性，采用独创的混合溶剂沉淀蛋白，建立了 好，氯诺昔康的保留时间约为6．5nlin，无内源性物 回收率高、方便、快速测定人血浆中氯诺昔康的 质干扰。 HPLC方法，最低检测限达12．O斗g·L～，足以满足 药动学研究的要求。 l仪器与试药 高效液相色谱仪：ShimadⅢLc-loAdvp型泵、 sPD一】OA型检测器、SIL-lOAvp型自动进样器、cTO． 10Avp型柱温箱及cLAss-VP6，1色谱工作站；xw- 80A型漩涡混合器(上海医科大学仪器厂)；80．2型 台式低速离心机及TcL—16B型台式高速离心机(上 海安亭科学仪器厂)。 乙睛为I{PLc级；磷酸、二乙胺、高氯酸、磷酸二 氢钾为分析纯；氯诺昔康对照品(北京瑞康明药物 研究所)纯度：99．6％；氯诺昔康片[可塞风@，奈科 mgo 明(奥地利)有限公司]，批号：213464，规格：8 2方法与结果 2．1溶液的配制 氯诺昔康储备液：精密称取氯诺昔康7．5mg， 置250mL量瓶中，加甲醇适量超声使溶解并稀释至 刻度，得30nIg·L“的储备液。 氯诺昔康对照品溶液：精密吸取上述储备液1 mL量瓶中，加流动相溶液稀释至刻度，得 mL置100 浓度为300斗g·L“的溶液，即得。 2’2色谱条件 1 0fl删i咖iIl ltg chroma‘09唧s h咖Pl鲳呦 流动相：乙睛．20m01·L“磷酸二氢钾·二乙胺 h眦‘鼬；c一 ^一Bl柏k 3∞M·L’1 pkm‘；B—Bkkpla‘啪咿k耐m (50：50：o．1)(以磷酸调pH为4．2)；柱温：50℃； m；进样量： 2．s线性考察 流速：1．0mL·min一；检测波长：372 mm×250 50吐；色谱柱：hlerstilC1B(4．6 mm，5 取空白血浆加入氯诺昔康储备液适量，使之成 cm(SUPELCO公司)；为含氯诺昔康12，60，150。300，600，l500帖·L’1 肛1)；预柱：Lc—18可换芯2 自动进样器