Callipyge侧翼微卫星DNA多态性与萨福克羊后臀发育相关性研究.pdfVIP

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2017-08-10 发布于安徽
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Callipyge侧翼微卫星DNA多态性与萨福克羊后臀发育相关性研究.pdf

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116 中国草食动物 2008年专辑鼻，’ ，j ￡；遗谴翼 ‘，1 Callipyge侧翼微卫星DNA多态性，， r‘ 季育种!，、与萨福克羊后臀发育相关性研究张英杰1，严亚博2，常建军3，刘月琴1 (1．河北农业大学动物科技学院，保定071000； 2．甘肃农业大学动物科技学院；3．徐水县畜牧局) 摘要：研究从Callipyge饲翼选取与肉羊后臀发育可能存在关系的5个微卫星基因座进行PCR扩增，计算群体遗传参数，时萨福克羊的后臀发育有亚著影响。关键词：肉羊I饭卫星DNA；g胥发育分子遗传标记与生产性状之问关系的研究对于畜牧业的生裹1般卫星DNA引物序列产实践具有重要意义。家畜的许多经济性状都是属于遗传力中、低的数量性状，难以用常规的育种技术来改良。随着分子生物学的发展，从分子生物学的角度研究动物候选基因的相关分子遗传标记，进行标记辅助选择是解决这类问题的方法之一。微卫星又称简单序列重复，是20世纪80年代末期发展起来的一种新型DNA标记，因数量多、分布广、多态性丰富、呈共显性遗传方式以及检测快速方便等优点而倍受推崇。近年来微卫星标记大部分应用于种群的多样性研究、种之间的亲缘关系、亲子鉴定和预测杂交优势等，而对基因座，等位基因与生产性能的相关分析研究较少。根据Cockett等对牛、绵羊18号染色体上的基因标记研究，本研究在肉羊双肌臀(Callipyge)基因侧翼选取5个微卫星位点，利用微卫星标记技术研究萨福克(Suffolk)肉用绵羊群体遗传多态性，并对微卫星位点的多态性进行统计分析，为进一步寻找与双肌臀生产性能相关的遗传标记提供理论依据。裹2 PCR反应体系 1材料与方法 1．1 试验动物及血液样品的采集在河北省唐县肉羊研究开发中心颈静脉采集萨福克成年公羊血液样品各50只，EDTA抗凝。冷冻带回实验室。并根据《家畜育种学》对采样羊只进行臀围和臀宽测量。 1．2微卫星引物设计参照CrawfordA．M．等的相关研究，在GenBank选取与肉羊双肌臀相关的微卫星引物，由大连宝生物技术有限责任公司合成。微卫星引物序列见表1。 1．3基因组DNA的提取 DNA提取参照《分子克隆实验指南)，采用常规酚一氯仿抽 1．5 PCR扩增条件提法并稍加改进。从血液白细胞提取DNA。加适量TE溶解 s，后，用1％琼脂糖凝胶电泳法检测所提取DNA的质量，合格后 rain， 59．5℃退火305，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸5 分装，一20℃保存备用． 4℃保存。 1．4 PCR扩增体系徽卫星BM3413扩增程序：94℃lmin。94℃变性30s，56℃ PCR反应体系组成见表2。退火305，72℃延伸30s，35个循环f72℃延伸5rain．4℃保存。遗传育种 2007--2008年全国养羊生产与学术研讨会议论文集 117 徽卫星TGLAl22、MCMA26扩增程序：94℃45s，60℃ 衰4萨福克羊群体不同标记基因型个体臀围 1rain，3个循环，94℃45s，57℃1rain，3