鸽毛滴虫病的研究进展.pdfVIP

在。螯合剂及各种金属离子对酶活都有 J．Kemvuol等运用o【一淀粉酶分泌表达片段。经T载体克隆及序列测定后， subtilis 不同程度的抑制作用。1mM的H一+、 信号实现了把来源于(Baciuus VTT Mn“、Cu2+、Zn“、Ba2+有中度抑制作用，lE一68013)的植酸酶phyC基因在phyC并电转化毕赤巴斯德酵母宿主菌 mM的EDTA、Cd“具有很强的抑制作用， 胚芽乳杆菌(L丑ctobacillusplantamm Y等研究 strain 测定，获得了阳性转化子，并进行了诱导 剩余酶活在20％以下。Wang 755)中的表达。Young一0k瞄m等 结果说明来源于枯草芽孢杆菌的这种中 表达。 用带有诱导型啊启动子的pET22b(+) 性植酸酶的生物学活性依赖C矿存在。 质粒构建了BaciUussp．DSll的表达载4．2在生产中应用研究WingkinYip Fe“、Co“、Mn“、Cu“和Zn“等金属离子对体pEPKI，转人大肠杆菌BL21(DE3)进等将中性植酸酶转入烟草细胞中，改变 酶活性均有不同程度的抑制作用，其中l 行表达，用IPllG诱导后3h，植酸酶的产 了磷酸肌醇的合成途径．使烟草体内为 mmoL的C02+、Cu2+和Zn2+抑制作用较为量占细胞总蛋白的20％，表达量为出发 新陈代谢提供了更多的可供利用的磷酸 强烈，其剩余酶活性均在60％以下。 菌株的50倍．产物具有和出发菌株植酸 盐。在磷酸盐缺乏的条件下，与野生型相 4应用现状 酶一样的热稳定性。吴琦等采用PCR 比．花和果实的数量明显增加。种子病害 近年来．由于生物技术的发展，中性 法，获得不含有信号肽序列的来源于枯 减少，IP们P5比例降低，促进了烟草的 植酸酶的分子生物学研究以及在饲料应 草芽孢杆菌的植酸酶phyC基因的非融 生长。曾虹等研究表明，在饼粕含量为 用效果中的研究层出不穷。目前已经报 合和融合表达片段．分别构建带有啊lac 65％的鲤鱼饲料中，添加1000U／kg的中 道并在GenBank中注册的芽孢杆菌植 性植酸酶可以将鲤鱼对饲料磷的利用率 启动子的大肠杆菌的植酸酶pE，I30 提高41％～59．4％。单位增重的磷排出降 酸酶基因序列有7个。基因序列揭示，在 NFphyC和pEl30F—phyC表达载体，并 植酸酶基因上游．有一30序列和一10序 转入大肠杆菌BL21(DE3)。大肠杆菌分低32％，添加1 列各一个。也有两个一35样序列和一个一 别在30qC和25℃经I胛G诱导后实现可替代0．18％～O．27％的有效磷。 10样序列的报道。信号肽位于氨基端， 了植酸酶的表达。YaoB等通过PCR的5结语 其信号肽切割位点的长度及氨基酸组成 方法Bacmussubtilis基因组中克隆了 随着饲料工业的发展。植酸酶已经 有所不同，多数为26个氨基酸残基，也 中性植酸酶基nphy’去除信号肽编码序 成为饲料添加剂和酶制剂研究的热点， 有20和30个氨基酸残基的报道．基因 列后克隆到大肠杆菌IPrrG诱导表达载但目前，对中性植酸酶的分子生物学、编 序列与来源于丝状真菌的基因均无同源 体pTYB40上，在大肠杆菌中得到了高码基因的分离克隆及表达、中性植酸酶 性。 效表达。吴琦等根据已知的枯草芽孢杆 在生产上的应用等方面还缺乏较深入的 4．1基因工程进展 由于中性植酸酶 菌WHNB02植酸酶phyC基因全序列设研究，寻找新的产酶来源。通过基因工程 来源的芽孢杆菌天然分泌能力较低。运 计一对引物，采用PCR法