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不同磷源及浓度对利玛原甲藻生长和产毒的影响研究 杨维东1，钟 娜1…，刘洁生1，张洁玲1，何洋1 (I．暨南大学生物工程学系，广东广州510632) 摘要：探讨了不同磷源条件下利玛原甲藻的生长情况，分析了碱性磷酸酶在营养盐利用方 shellfish 面的作用，对不同营养盐条件下腹泻性贝毒(diarrhetic poison，DSP)的合成情况 进行了比较和分析，结果显示，以NaH。PO。，B一甘油磷酸钠和ArIP分别作为唯一磷源时， 显高于NaH：PO。组和B一甘油磷酸钠组。这些结果表明，利玛原甲藻可吸收利用无机磷 Nail：PO。和有机磷p一甘油磷酸钠及ATP；利玛原甲藻对不同来源的磷利用情况不同，可直 接利用B-甘油磷酸钠，ATP则需要碱性磷酸酶水解后才能利用；利玛原甲藻毒素的合成 与营养盐的形态有关，不同营养盐条件下DSP的合成不同。B-甘油磷酸钠为磷源时，DSP 合成量最多。磷盐对DSP合成的影响可能与该磷盐条件下利玛原甲藻的生理状态有关。 关键词：利玛原甲藻；磷源；碱性磷酸酶；腹泻性贝毒 1 引言 磷是海洋、湖泊等水生生态系统初级生产力水平的关键限制因素，对藻类的生长起着至关 重要的作用。因为无机磷能被藻类直接吸收利用，被认为是藻类最重要的磷源，但是当缺乏无 机磷时，浮游藻类可以通过碱性磷酸酶利用有机磷来维持藻类的生长…。 利玛原甲藻属甲藻门(Pyrrophyta)原甲藻科(Prorocentraceae shellfish Ehrenberg)为海洋底栖甲藻之一，是最常见的腹泻性贝毒(diarrheticpoison，DSP)产毒 藻，被认为是DSP标准的可靠来源旧J。DSP是一类结构独特的多醚类化合物，其成分主要为 大田软海绵酸(okadaic 2A的特异抑制剂，同时又是促癌剂，可在贻贝肝、脾中积累，从而引起食用者腹泻性中毒。尽 管到目前为止尚未见有此类DSP中毒引起人类死亡的报道，但近年来的调查显示，世界范围 内DSP污染和中毒事件非常广泛，致病率极高，几乎所有发达国家都在本国海域发现和检出 本类毒素。在我国辽东湾、胶州湾、莱州湾、秦皇岛、福建等海域及天津、烟台、连云港、舟山、深 圳、香港等沿海城市均发现DSP，黄海、渤海和南海水域则发现有DSP产毒藻∞J。为揭示和阐 明底栖甲藻的磷营养利用机理、明确利玛原甲藻的产毒机制，本研究观察了不同磷源条件下利 玛原甲藻的生长情况，探讨了碱性磷酸酶在营养盐利用方面的作用，比较和分析了不同营养盐 条件下DSP的合成情况。 ·19l· 2材料与方法 2．1 藻种 NationalCenterforCul— 利玛原甲藻(Prorocentrumlima)，由美国CCMP(Provasoli—Guillard tureMarine of Phytoplankton)提供，编号为2579。 2．2主要试剂 DiarrheticShellfish Test Laboratories Poison(DSP)QuickKit(PanapharmCo．，Ltd．Japan) 购自北京必发分析系统销售有限公司。 2．3实验方法 2．3．1 利玛原甲藻的培养 源，其他元素按照f／2培养液配方添加。设置5个磷浓度：o．5，l，2，5和10 IjuInoL／din3。取对数生长 000 期利玛原甲藻接种于培养基中，接种密度约为1．0×106L～。置于温度(22±1)℃、照度4lx， 光暗循环为12：12的人工气候箱中进行培养。实验每组设