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RGDV对金黄地鼠颊囊癌血管生成的影响 张洁’．王丽京事，赵嫒1，韩冰2，马字光1． 。广州大学城广东药学院基础学院，510006 数 细胞表面粘附分子 摘要RGD肽是由精氨酸一甘氨酸—天冬氨酸(Arg-Gly—Asp，RGD)构成的一种三肽，是大多 所能识别的最小氨基酸序列。其能与细胞表面粘附分子中的整合素受体发生特异性的结合，从而介导细胞和细胞、细胞和基 质之间发生的粘附作用，并参与细胞的增殖、分化、凋亡、炎症、伤El愈合及肿瘤的侵袭转移等。本研究采用合成的精氨酸 一甘氨酸一天冬氨酸一缬氨酸(RGDV)作为实验性治疗药物，以化学致癌剂(DMBA)诱导的金黄地鼠颊囊癌模型为研究对象． 探讨RGDV抗肿瘤的作用机理。本研究通过建立金黄地鼠颊囊癌模型，诱癌成功后腹腔注射RGDv两次／周，共4周。观察晒Dv 对肿瘤生长的抑制作用，并采用免疫组织化学的方法检测肿瘤中v盯的表达。研究结果；结果表明：RGDV能抑制金黄地鼠烦 m3，，瘤 m3，而实验组肿瘤体积仅为217．87-1-39．80 囊癌的生长。RGDV治疗4周后，对照组肿瘤体积为434．59-t-75．28 制肿瘤新生血管形成丽发挥抗肿瘤生长的作用． 关键词：陆Dv；颊囊癌；血管生成；微血管密度 中常见的基本成分，也是广泛存在于细胞间识别系统的基本单位，细胞外基质及基底膜中的纤维连接蛋白 酸序列，该序列能与细胞表面整合素特异性结合，从而介导许多重要的生命活动。人工合成RGD类多肽的应 用正是模拟细胞外基质蛋白结构中所共有的氨基酸序列，竞争性地与肿瘤细胞表面的整合素受体结合，抑 制细胞与基质之间的粘附，达到抑制肿瘤生长的目的。近年来，国内外在这方面也进行了大量的研究。Chen 等研究结果表明RGD-tachyplesin能够抑制肿瘤细胞在鸡胚尿囊膜和同系小鼠中的生长…。 肿瘤的生长及转移需要充足的血液供给，除非在原有的主体血管基础上大量新血管出芽生长使肿瘤获 得充足的血液供给，实体肿瘤生长一般都不能超过一定体积。在口腔鳞状细胞癌中，已经证实血管生成与 肿瘤的转移、病变的进展以及预后紧密相关心J1。切断肿瘤组织获得营养途径已经成为新的肿瘤治疗靶点。 本实验选用金黄地鼠颊囊癌模型，采用免疫组织化学的方法检测肿瘤中vWF-VIII的表达，计算肿瘤的微血 管密度，探讨RGDV抗肿瘤的作用机制。 l材料 g，普通合格 1．1实验动物选用兰州生物制品研究所的叙利亚金地鼠40只。鼠龄8周，体重90-110 溶剂丙酮(分析纯)。 1．3 RGDV(精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸一缬氨酸)由本校生命科学院生物化学与分子生物学研究室合成 提供，纯度90％。 DAB显色剂．上海华舜生物工程有限公司。 2．方法 2．1模型建立40只金黄地鼠随机分为两组：空白对照组8只，不作任何处理，实验结束时处死取材： 正常饲养至12周，经统计学方法分析体重、肿瘤体积，筛选出参与实验的金黄地鼠22只，随机分为二组， 一个药物处理组每组11只，对照组11只。 2．2 0．03mmol／kg。每周腹腔给药两次，对照组给予同体积的生理盐水，每周记录各组肿瘤大小及地鼠体重， 持续治疗四周后处死地鼠。 2．3组织取材及病理切片用锋利刀片将大的瘤块切开，小的瘤块切破包膜，置于适量10％中性缓冲福 u 尔马林固定24h，经组织脱水、透明、渗蜡。石蜡包埋，以5m厚度连续切片，每个标本切片6～8张。 洗三次／lOmin；DAB显色；流水终止反应；苏木素复染；脱水；封片。 2．5观察方法 瘤体抑制率=I-(实验组治疗后平均瘤体积一实验组治疗前平均瘤体积)／(对照组治疗后平均瘤体积一 对照组治疗前平均瘤体积) 高处，高密度血管多位于肿瘤边缘：再在高倍镜(200X)下，以与周围肿瘤细胞和结缔组织成份明显区剐 的任何一个棕色染色的内皮细胞或细胞丛