CD22单抗效应子功能的初步探究.pdfVIP

治疗性制剂 单抗效应子功能的初步探究 王光裕高 凯王军志 中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定方法及其 标准化重点实验室北京 摘要 单抗属于 型抗体用于治疗非霍奇淋巴瘤 该抗体结合靶细胞后会迅速内化这 使得用传统的肿瘤细胞增殖抑制法无法通过直接作用机理真实反映抗体作用机制 国外采用的活性检测方 法是将 单抗包被到细胞板上后加入靶细胞通过 抗体对细胞受体的特殊致敏性来介导杀伤但 是该过程并未加入补体或杀伤细胞不能客观有效模拟抗体作用机制和反映段效应子是否存在功能 基 于以上背景本课题下篇采用膜表面表达 单抗独特型抗体的靶细胞株 人工构建 单抗结合后不 会内化 首先利用该细胞证明 单抗具有 和 活性随后用多种方法检验了抗体的脱糖效 果通过糖基化去除进一步验证单抗 段结合能力与段效应子生物学功能 实验分别通过 单 抗与 单抗作为阳性对照证明 单抗 和 的活性检测系统可以正常工作 在 实 验中对补体添加顺序和靶细胞种类进行了优化实验中对细胞浓度抗体稀释梯度进行了优化 在 对切糖效果验证时发现实验所用的酶切条件可以完全将糖基切除 在探究糖基化对功能的影响时用两种 方法 竞争流式细胞法和 比较了脱糖前后的 段结合力发现切糖前后结合力并无显著差异 随 后依据优化后的活性检测方法选取合适的抗体剂量点比较了脱糖前后的和活性发现脱糖后 两种效应均显著降低该结果证明了 单抗效应子段具有和功能 目前 单抗质量 研究中并未纳入 与评价部分所以该部分研究对于该抗体的质量评价具有重要意义 本研究对 于存在迅速内化现象的单抗在没有合适活性测定方法的情况下本课题为评价 效应子 和功 能提供了参考 通过以上两部分工作本课题为抗体及抗体相关生物治疗药物质量评价指南的制定提供了 参考和数据支持 关键词 抗体药物 融合蛋白质量控制 糖基化