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“情绪与健康和疾病及其中医药干预”国际学术研讨会论文
“恐伤肾”实验深入及筛选的基因分析术
、
矿
王米渠≮ ● 王 刚 杨 红亚 王儒芳 一
0064)
(1．成都中医药大学四川成都610075；2．四川大学四川成都61
摘要 目的：采用抑制消减杂交法(ssH)筛选“恐伤肾”的差异表达基因，发现与应激肾虚
相关的一纽表达基因，以拓展肾虚证的分子生物学研究广度。 方法：结合使用“猫吓鼠”与“反吊荡
水”两种方法，造“恐伤肾”应激肾虚的动物摸型。建模前后眼底静脉丛采血，提取总RNA，用SMART
片段，同时抑制非目标片段扩增。结果：通过高纯度的RNA获得和总cDNA的合成，进而取得了惊恐
应激致肾虚的10个差异基因图谱，图谱中补肾治疗组更接近对照组，优于惊恐肾虚组。在这10个差
16s
rRNA、 rRNA基因等7个基因表达谱。结论：通过ssH
缬氨酸一tRNA、亮氨酸一tRNA基因及12s
新发现的7个惊恐应激功能基因(即与肾虚相关的表达基因)，与从oMIM中检索到的与恐惧相关基因有
所不同，这为深入研究肾虚证提出了新的问题。SSH结合基因芯片技术，可望对中医肾虚证复杂分子机
理进行探索的提供良好前景。
关键词 “恐伤肾”；恐惧基因；抑制消减杂交(SSH)；差异表达基因；肾虚
of “Fear
Abstract Toscreenthedifferential impairs
0bjective 1yexpressedgene
methodof
discoverasetof relatedwithKidneyDeficiencybyutilizing
Kidneyand genes
thatwidenthe ofm01ecularresearch
subtractive so scope
suppression hybridization(SSH)，
of themethodsof mousewithcatand
KidneyDeficiencySyndrome．MethodCombining “fearing
water”to animalmodelofmouse’s
mouseover kidneyDeficiencyZheng．
“suspending get
from
The ofSMARTwasusedto thetotalful cDNAs themice’sblood
technique get 1一length
to the
cellsandSSHwas in and directionsacqui
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