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营养因子对大肠杆菌发酵产转氨酶的影响研究 1潘自皓 周华 高振 韦萍 (南京工业大学制药与生命科学学院，江苏 南京 210009) 摘 要 转氨酶是酶法制备 L-苯丙氨酸的反应体系中的关键酶，本实验以合成培养基作为研究工具，运用 “单一组分缺失法”研究了 18 种L 型氨基酸，11 种维生素，8 种微量元素，4 种嘌呤与嘧啶对大肠杆菌 A5 发酵产天冬氨酸转氨酶的影响。实验研究表明，L- 甲硫氨酸对大肠杆菌A5 的生长与产酶影响最大，L- 缬氨酸、L-异亮氨酸与L-谷氨酸则分别对菌体生长和酶转化得率有较显著的促进作用，在此基础上构建了 一个适于菌体生长与产酶的合成培养基，发酵产酶的转化得率达到72.4% 。 关键词 合成培养基 单一组分缺失法 转氨酶 Nutritional requirements for the growth and aspartate aminotransferase production by Escherichia coli A5 PAN Zihao, ZHOU Hua, GAO Zhen, WEI Ping (College of Pharmacy and Life Science, Nanjing University of Technology, Jiangsu Nanjing 210009) Abstract Aminotransferase is a very important enzyme for the enzymatic preparation of L-phenylalanine. In this study, employing chemically defined medium as researching tool, the single-omission technique was applied to investigate the effect of “18 kinds of amino acid, 11 kinds of vitamin, 8 kinds of trace element and 4 kinds of purine and pyrimidine” on the fermentation of aspartate aminotransferase. As a conclusion, L-methionine was the only essential compound for both growth of Escherichia coli A5 and production of aspartate aminotransferase, L-valine, L-isoleucine and L-glutamic acid was sufficiently helpful for incubation of the strain and preparation of the enzyme respectively. On the basis of nutritional requirements, a modified minimal chemically defined medium was formulated, the yield of L-Phenylalanine in MMCDM was 72.4%. Keywords chemically defined medium ，the single-omission technique ，aspartate aminotransferase 引 言 合成培养基(Chemically defined medium，CDM)，是一类按微生物的营养要求精确设计 后用多种化学试剂配制成的培养基，可以完全由无机盐或无机盐加有机化合物(氨基酸、糖、 嘌呤、嘧啶和维生素等)组成，成分含量都是已知的，可用来研究某种营养物或药物对微生 物代谢的影响。但由于其价格较贵，配制烦琐，且微生物生长比较一般，因此过去通常仅用 于营养代谢、生理生化、遗传育种、菌种鉴定或微生物测定等对定量要求较高的研究工作中。 目前，在一些发酵工业，尤其是在生物产品的制备中，合成培养基的使用正越来越受到重视。 虽然现在还不适用于大多数的工业生产，但是在