紫外分光光度法测定加替沙星片中间体含量.docVIP

紫外分光光度法测定加替沙星片中间体含量 概况 苏中药业是一家有着三十年历史，专业生产制造药品的综合性厂商。多年来，在中西药制剂方面源源不断地给市场提供了一百多个品种的优良药剂产品。加替沙星片是我公司研制开发的新一代氟喹诺酮类抗菌药，它具有抗菌谱广、抗菌活性强、口服生物利用度高、临床副作用小等优点。目前车间生产出来的加替沙星片中间体（制粒后）用HPLC法进行含量测定高效液相法对加替沙星中间体进行含量测定具有检验结果非常准确的优点，但同时存在检验周期长，检验费用高，检验效率低的问题，而且仪器价格高，车间没有配备该仪器，因此车间不具备检验能力，必须送至公司中心化验室进行检测，这样跨部门的传递极大的降低了车间生产的效率。紫外分光光度法进行含量测定具有检验结果准确，同时检验周期短，检验费用低，检验效率高的特点，同时车间配备该仪器，人员具备相应技能，可在车间自行检测，这样大大提高了车间生产的效率。紫外分光光度法测定加替沙星片中间体的含量 2 分析过程 确定最大吸收波长，排除辅料对吸收度的影响 配制加替沙星对照品溶液约25ug/ml和空白辅料溶液，照紫外分光光度法，于250350 nm之间扫描，对照品在293 nm波长处有最大吸收，且空白辅料在此波长无吸收，因此选定波长为293 nm。加替沙星对照品吸收谱见图辅料吸收光谱见图 图加替沙星对照品吸收谱图 图辅料吸收光谱图 确定对照品及样品的溶解介质及处理方法 溶解介质的选择 根据加替沙星在酸性溶液下易溶解的特点，选定0.1 mol/L盐酸作为溶解介质，并进行测定，比较实验结果显示，加替沙星的稀盐酸溶液很稳定，且较HPLC法选用的溶解介质（稀磷酸－磷酸盐）更为简单。 处理方法的确定 因为加替沙星在稀盐酸溶液下具有良好的溶解性，且溶液稳定，故样品处理只需加入稀盐酸，摇匀，静置30 min，再以滤纸过滤即可。 确定检测浓度 由于紫外吸收测定含量具有一定的系统误差，只有吸光度控制在0.3－0.7之间才能最大限度的减少误差，因此需要调节对照品及样品浓度，使其吸光度确定在0.4左右，才能尽可能的减少系统误差，保证检验结果的准确。 通过实验，确定加替沙星浓度在5ug/ml时，吸光度值在0.4－0.5之间，因此选定目标物及加替沙星浓度为5ug/ml。 标准曲线测定 称取加替沙星对照品10.0mg至100ml量瓶中，加入0.1mol/L稀盐酸溶解并稀释至刻度，作为储备液。分别吸取上述储备液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，7ml，8ml至100ml量瓶中，以稀盐酸稀释并定容至刻度，在293nm处测定吸光度，以吸光度A(Abs)对质量浓度（ug/ml）进行回归，回归方程及曲线见图二： 图二 标准曲线图 A=0.0881ρ+0.0026 r=0.9999 线性范围为ρ＝1.0－8.0 ug/ml 因此，在浓度范围1.0－8.0ug/ml内，吸光度与浓度呈现良好的线性关系，也就是说浓度与吸光度成比例。 进行稳定性试验 取同一样品即时测定，并分别放置2，4，6，8 h后测定，结果对照品溶液和供试品溶液在8 h内分别测得的结果基本相同，吸光度变化的RSD％分别为0.2％和0.3％，因此可以说明对照品和供试品溶液在8 h内保持稳定。 （表七：稳定性试验结果） 2h 4h 6h 8h RSD％ 对照品吸光度 0.4467 0.4472 0.4482 0.4458 0.2％ 样品吸光度 0.4709 0.4723 0.4695 0.4687 0.3％ 进行重复性试验 取同一批样品，精密称定6份，分别按样品含量测定方法处理后进行测定，结果见表七： (表八：重复性试验测定结果) 编号 百分含量 平均含量 RSD％ 1 97.34% 97.18% 0.17% 2 96.94% 3 97.39% 4 97.14% 5 97.22% 6 97.07% 进行加样回收试验 精密称取不同批号加替沙星片样品适量（见下表），加入0.1mol/L稀盐酸溶解并静置30min，过滤作为溶液①；再精密称取12.4mg加替沙星对照品至25ml容量瓶中，并加入0.1mol/L稀盐酸同法配制成0.496mg/ml的溶液作为溶液②。 分别吸取溶液①和溶液②各 1ml至100ml容量瓶中，加入上述稀盐酸稀释并定容至刻度作为供试品溶液，并进行回归测定。结果平均回收率＝98.97％，RSD＝0.67％。 （表九 回收率测定结果） 批号 样品中含加替沙星 加入量 测得量 回收率％ 平均值％ RSD 031201 0.4940mg 0.496mg 0.9913 100.13％ 98.97％ 0.67％ 040414 0.5123 mg 0.99