5-杂氮-2＇-脱氧胞苷对肺癌细胞小分子RNA let-7a-2表达的影响.pdfVIP

280 中日友好医院学报 2014年第 28卷第 5期 JournalofChina-JapanFriendshipHospital2014Oct，Vo1．28，No．5 ， 5一杂氮一2一脱氧胞苷对肺癌细胞 小分子RNAlet一7a一2表达的影响 吉 丛 ，夏启胜 ，李红艳2，刘 轩 ，徐 波 ，周天红 ，陈志华 ，喻长远 (1．北京化工大学 生命科学与技术学院，北京 100029； 2．中 日友好 医院 临床 医学研 究所 生物化学与分子生物学研 究室，北京 100029) 摘要 目的：观察去 甲基化药物对人肺癌 A549和 H1299细胞增殖 、凋亡以及小分子RNA let一7a一2表达的影 响。方法 ：以不 同浓度的 5一杂氮一2一脱氧胞苷 (DAC)对肺癌细胞进行处理后 ，CCK一8检测对细胞增殖 的影 响， AnnexinV—PI双染法检测对细胞凋亡 的影响 ，qRT—PCR对 let一7a一2的表达进行检测 。结果 ：A549和 Hl299细 胞经不 同浓度 DAC处理后细胞增殖受到 明显抑制 ，以6OvuM浓度 DAC处理后 d5抑制率分别为 (40．80± 6．5O)％和 (47．24_+4．95)％(均 PO．05)，同时细胞呈现显著性早期凋亡 ，凋亡百分 比分别达 (64．58~4．21)和 (59．61_+5．69)(均 PO．05)。20txM、40tzM、601xM DAC处理后 let一7a一2的表达量在 A549中分别为 (10．86_+0．30)、 (5．02_+2．83)、(17．79_+1．95)，比对 照组 (1．12_+0．24)显著上调 ；在 H1299中分别为 (55．13~5．69)、(35．67_+4．13)、 (14．94~2．46)，比对照组 (1．31±0．56)显著上调。结论 ：DAC处理可抑制肺癌 A549和 H1299细胞增殖 、促进细胞 凋亡 ，上调 1et一7a一2的表达 ，let一7a一2基 因调控区域超 甲基化可能是其在肺癌细胞 中表达异常的机制之一 。 关 键 词 ：肺癌 ；去甲基化药物 ；5一杂氮一2一脱氧胞苷 ：1et一7a一2 中图分类号 ：R734 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001—0025(2014)05—0280—05 doi：1O．3969~．issn．1001—0025．2014．05．007 The effectof5-aza一2-deoxycytidineon expression ofmiRNA let-7a-2 in human lung cancercells／／JI Cong，XIA Qi—sheng，LIHong-yan，etal／／JournalofChina-JapanFriendshipHospital，2014Oct，28(5)： 280-284 Abstract Objective：Toobservetheeffectsofdemethylatingagentoncellproliferation，apoptosisandexpres— sion ofmiRNA let一7a-2 in human lung cancercelllinesA549 and H1299．Methods：A549 and H1299 cells weretreatedwithdifferentconcentrationofdemethylatingagent5-aza-2-deoxycytidine(DAC)．Cellproliferation wasmeasuredwithcellcountingkit(CCK-8)．ApoptoticratewasdeterminedwithAnnexinV—PIdoublestaining on flow cytometry．The expression oflet-7a-2