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酶工程复习资料 第一章：绪论 1、酶的概念：酶是由生物体产生的具有催化功能的生物大分子。按照其化学组成，可以分为蛋白类酶（P酶）和核酸类酶（R酶）两大类别。 酶具有蛋白质的哪些属性：①组成成分 ②两性电解质 ③亲水胶体基团 ④结构 ⑤水解成氨基酸 ⑥变性（受物、化影响） 2、酶的生产、改性与应用的技术过程成为酶工程。 3、酶的生产是指通过各种方法获得人们所需的酶的技术过程，主要包括微生物发酵产酶、动植物培养产酶和酶的提取与分离纯化等。 4、酶的改性是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶定向进化等。 5、酶工程的主要内容包括：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。 6、酶的特性：①酶催化作用的专一性强；②酶催化作用的效率高；③酶催化作用的条件温和；④酶的催化活力可受各种因素的调节；⑤酶的催化活力与辅酶、辅基及金属离子有关。 7、酶的专一性是指在一定的条件下，一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型反应的特性。分为绝对专一性和相对专一性。 8、绝对专一性是一种酶只能催化一种底物进行一种反应，这种高度的专一性称为绝对专一性。 9、相对专一性：一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反应，这种专一性称为相对专一性。相对专一性分为：键专一性和基团专一性。 10、酶催化反应的效率之所以这么高，是由于酶催化反应所需的活化能显著降低。 11、提高反应效率的因素：邻近效应与定向效应；底物分子的敏感键发生形变；共价催化；酸碱催化；微环境的影响。 12、影响酶催化作用的因素：①底物浓度的影响 ②酶浓度的影响 ③温度的影响 ④pH的影响 ⑤激活剂的影响 ⑥抑制剂的影响 13、 Km为米氏常数，是酶催化反应速度等于最大反应速度一半时的底物浓度。 14、pH之所以影响酶的催化作用，只要是由于在不同的pH条件下，酶分子和底物分子中基团的解离状态发生改变，从而影响酶分子的构象以及酶与底物的结合能力和催化能力。在极端的pH条件下，酶分子的空间结构发生改变，从而引起酶的变性失活。 15、抑制作用包括可逆抑制剂和不可逆抑制剂。 16、竞争性抑制是指抑制剂和底物竞争与酶分子结合而引起抑制作用。 竞争性抑制的特点：是酶催化反应的最大反应速度Vm不变，而米氏常数Km增大。 17、非竞争性抑制是指抑制剂与底物分别与酶分子上的不同位点结合而引起酶活性降低的抑制作用。 非竞争性抑制的特点：最大反应速度Vm减小，而米氏常数Km不变。 18、反竞争性抑制：在底物与酶分子结合生成中间复合物后，抑制剂再与中间复合物结合而引起的抑制作用称为反竞争性抑制。 反竞争性抑制的特点：最大反应速度Vm和米氏常数Km同时减小。 19、能够增加酶的催化活性或使酶的催化活性显示出来的物质称为酶的激活剂或活化剂。 20、蛋白类酶分为：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶或连接酶。 根据酶催化反应类型，可以将核酸类酶（R酶）分为剪切酶、剪接酶和多功能酶。 核酸类酶分为（了解）：分子内催化R酶（分为自我剪切酶、自我剪接酶）和分子间催化R酶（分为RNA剪切酶、DNA剪切酶、多肽剪切酶、多糖剪接酶、氨基酸酯剪切酶、多功能酶）。 21、酶活力是指在一定条件下，酶所催化的反应初速度。在外界条件相同的情况下，反应速度越大，意味着酶活力越高。 22、酶活力单位：在特定条件下（温度可采用25℃，PH等条件均采用最适条件），每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位，这个单位称为国际单位（IU）。 23、国际上另一个常用的酶活力单位是卡特（Kat）。在特定条件下，每秒催化1 mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特（Kat）。 24、两种酶活力单位之间可以互相换算。即：1Kat=1mol/s=60mol/min=60×106μmol/min=6×107IU 25、酶的转换数Kp，又称为摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。即每摩尔酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数。 26、固定化酶的活力测定方法：①振荡测定法 ②酶柱测定法 ③连续测定法。 酶结合效率和酶活力回收率的测定： 27、酶结合效率又称为酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率。 酶活力回收率是指固定化酶的总活力与用于固定化的总酶活力的百分率。 28、酶的生产是指通过人工操作而获得所需的酶的技术过程。（与酶的发酵生产比较） 30、酶的生产方法包括提取分离法、生物合成法、化学合成法。 31、酶的提取：是指在一定的条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂中的过程。 主要的提取方法有：盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取和有机溶剂提