真菌α淀粉酶制剂的提纯及保存方法.pdfVIP

真菌a．淀粉酶制剂的提纯及保存方法。 刘仲敏1 郭士军2 薛永梅2 张新武1 刘安邦 l(河南省科学院生物研究所，郑州，450008)2(郑州海韦力食品上业有限公司，郑州，450044) 摘 要 以米曲霉zL¨3菌株经固态发酵生产的真菌a一淀粉酶粗制品(发酵曲)为原料．对其提纯、精制的工艺 条件和保存方法进行了研究。其最佳提纯工艺条件为：培养好的发酵曲采用40℃温水，pH值7．5左右，加水比 为l：4，浸泡3 6．O～6 h。压滤滤液经超滤浓缩后，在10～15℃．pH 5，与食用酒精混合为酒精体积分数为70％ 的溶液出静置沉析．过滤后于40℃低温干燥。采用谊工艺条件进行粗酶提纯，产品综台回收率稳定在70％以 416 608 上，最高达到74％，产品酶活力最高达25 u☆，平均达16 u詹，卫生标准达到食品缎标准。通过精制酶的 保存试验研究，确定了一种真菌a一淀粉酶稳定剂配方，其添加至精制酶后，常温下半年的酶活力保存率达到 95％以上．1年的保存率可达到90％以上。 *键词真菌廿淀粉酶，提纯，保存 酶制剂作为一类重要的催化剂和添加剂，其物理 1．2分析方法 性状应满足应用行业的加工工艺要求。固态发酵生 真菌n一淀粉酶酶活力测定：参照参考文献[1]。 产的真菌a一淀粉酶粗制品(发酵曲)虽然在酶学作用 pH值测定：精密pH仪测定。 方面可以满足相关应用行业的需要，但由于粗制品的 含水量的测定[2]：定量的样品于105±2℃烘干2 杂质多，导致其在部分食品工业中的应用受到限制。 h，计算含水量。 目前国内尚不能工业化批量生产真菌a一淀粉酶，对于 2工艺流程图 该酶的分离、提纯方面所做的研究工作也甚少。 近年来，本课题组在完成了真菌a一淀粉酶高产菌 发酵曲(粗酶)!!!竺z!!譬浸提一压瘟一滤渣一饲料 株诱变选育和固态发酵工艺及酶学性质研究的基础 上，开展了真菌d一淀粉酶的分离、提纯工艺研究和产 乙醇沉折一一起滤浓缩t一稀酶液 T 品保存研究，确定了以浸提、压滤、超滤浓缩和冷冻沉 过滤一酶泥(饼)斗低温烘干一标准化斗成品 析为丰的工艺技术路线和工艺条件，形成r一套完整 图1真菌n淀粉酵提取T艺流程图 的真菌a，淀粉酶分离提取工艺技术。并采用该工艺 技术开发生产了食品级精制真菌a一淀粉酶制剂。同 3结果与讨论 时，通过试验研究，确定了食品级真菌“一淀粉酶制剂 3．1浸提工艺参数的确定 的保存方法。 浸提收率的高低直接影响到产品的综合回收率。 1材料与方法 为此，选取了影响浸提收率的浸泡温度、浸泡时间、浸 泡液pH值、加水量4个因素进行试验，根据真菌a一 1．1材料与设备 淀粉酶的酶学性质和各因素单项试验结果，各确定了 真菌a一淀粉酶发酵曲：郑州海韦力食品工业有限 3个水平进行正交试验。具体试验设计及结果分别 公司中试车间生产(单克酶活力达950u以上)。 见表1和表2。 中空纤维内压式超滤设备：郑州宁联水处理有限 表1正交试验因素水平表k(34