超高效液相色谱法对罗非鱼中3种氟喹诺酮类兽药残留的测定.pdfVIP

现代农业科技 2013年第 8期 食品科学 超高效液相色谱法对罗非鱼中3种氟喹诺酮类兽药残留的测定 李盛安 冯敏铃 李拥军 (广东省中山市农产品质量监督检验所，广东中山 528400) 摘要 建立了罗非鱼肉中3种氟喹诺酮类兽药残 留的定量分析方法。方法以乙腈一磷酸二氢钾溶液 (3：1，v／v)为提取溶剂，提取液过固 相萃取小柱BONDELUT—C18净化 ，3种 目标化合物采用超高效液相色谱一荧光检测器检测，外标法定量。添加0．o05加．100msk／g浓度水 平时，罗非鱼中3种氟喹诺酮类加标回收率在 84％一93％，相对标准偏差 (RSD)为3．9％～6．7％。方法检 出限(sni=3)为0．7—1．6 g，l(g，定量限 (S／N=10)为25 g。该方法前处理简单，快速有效，准确可靠，可用于水产品氟喹诺酮类兽药残留日常抽样快速检测。 关键词 超高效液相色谱 ；荧光检测器；氟喹诺酮残留；罗非鱼 中图分类号 o657．72：TS207．5 文献标识码 A 文章编号 1007—5739(2013)08—0279—02 氟喹诺酮类药物 Fluoroquinolones(FQS)是近 30年来迅 超纯水系统 AIO(美国Millipore公司Milli—Q)；Waters超高 速发展起来 的一类人工合成药物 。具有广谱 、高效等特点。 效液相色谱仪 (带荧光检测器)。 其主要用作兽药和饲料添加剂，用以预防和治疗动物疾病， 1．2 试验方法 在临床上使用较为广泛 1]【。早在 20世纪 80年代 ，在水产养 1．2．1 样品提取 。称取 2g(精确到 0．01g)去磷去腮后绞碎 殖中就 已经开始使用氟喹诺酮类药物来预防和治疗细菌性 的样品 ，置 50mL离心管 中，用 10mL乙腈一磷酸盐缓冲 疾病。由于在水产养殖过程 中使用氟喹诺酮类药物 ，造成 溶液(3：1，v／v)旋涡混合分散成糊状 ，中速振荡5min，10000 了水产品中的氟喹诺酮类药物残留，增强了致病菌的耐药 r／min离心 5min，倒出上清液。残渣重复提取 1次，合并上清 性 ．这种耐药性通过食品传递给人 ，使人产生难以治愈的疾 液，混匀，备用。 病。近年来，水产品中氟喹诺酮类药物残留已经弓1起了广泛 1．2．2 样品净化 。固相萃取柱先依次用甲醇、磷酸盐缓冲溶 关注2[1。 液各 2mL预洗。取备用液 5．0mL过柱 ，用 1mL水淋洗 ，挤 关于氟喹诺酮类药物的检测方法研究报道 ，一般有高 干。用流动相 1．0mL洗脱 ，挤干 ，收集洗脱液 。过0．22 m滤 效液相色谱I引、液相色谱一串联质谱法 、免疫测定法等5[】，液 膜，上机。 质联用法虽然灵敏度和准确度都较高，但成本也相对较高， 1．2．3 色谱条件 。色谱条件如下：色谱柱 ：ACQUITYUPLCMT 不易普及；免疫测定法前处理简单，但存在假阳性高、准确 BEHCl8柱 (2．1x50mm，1．7Izm)；流动相 ：0．05mol／L磷酸溶 率相对较低 的问题。高效液相色谱荧光检测器对动物源食 液／三乙胺+乙腈 (92+8，vv／)，等度洗脱 ；流速 ：0．4mL／min；柱 品中FQS药物残留进行检测 ，前处理方法简单 ，且成本较 温：室温 ；进样量 10 L；检测波长 ：激发波长280am，发射波 低 ，而在此基础上利用超高效液相色谱 (UPLC)，与传统的 长450nm。 HPLC技术相比．UPLC具有更强的分离能力 ，大幅度地改善 2 结果与分析 了液相色谱 的分离度和灵敏度 。UPLC可以在很宽的线速 2．1 色谱条件的优化 度 、流速和反压下进行高效的分离工作 ，节省试剂 ，最大限 氟喹诺酮类药物结构上有羧基和哌嗪基 ，具有酸碱两 度地缩短了方法检测所需的时间，受到广大用户的青睐。该 性。由于分子结构相似 ，在水溶液中呈离子 的形式存在 ，