罗苏伐他汀对糖尿病大鼠周围神经病变的影响.docVIP

罗苏伐他汀对糖尿病大鼠周围神经病变的影响 袁 瑾，崔世维，胡 江，朱晓晖，彭亮亮 摘要目的 探讨罗苏伐他汀对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠周围神经病变的治疗作用及其机制。方法 12只SD雄性大鼠随机分为健康对照组Ⅰ和Ⅱ各6只，21只STZ糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组、生理盐水治疗组和罗苏伐他汀治疗组各7只。各组均于该组实验结束后行空腹血糖、总胆固醇、坐骨神经传导速度(SNCV)测定，并取坐骨神经行免疫组化检查。结果 各组治疗前后血糖、总胆固醇相比无差异比，明显降低均有明显差异CD34、血管内皮细胞生长因(VEGF)、内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)CD34表达较明显增多，与正相近。结论 罗苏伐他汀可改善STZ大鼠糖尿病周围神经病变，这种作用不依赖其降脂效应，而与坐骨神经的CD34、nNOS、eNOS 和VEGF表达上调，神经滋养血管的恢复有关。 关键词罗苏伐他汀；糖尿病周围神经病变；神经滋养血管；坐骨神经传导速度 中图分类号：R 文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2009) 糖尿病周围神经病变（DPN）是较常见的糖尿病并发症DPN的发病机制复杂，已提出的病因学包括超氧化自由基的产生改变的多元醇代谢蛋白糖化等近年来血管损害引起神经内膜缺血在DPN发生发展中的作用引起共识，他汀类药物为常用的降脂类药物，有促血管生成效应，且不依赖于其降脂效应。本研究探讨罗苏伐他汀对糖尿病大鼠周围神经病变的影响及其机制。 1 材料与方法 1.1 分组 2月龄健康雄性SD大鼠36只，体150~220 g，由南通大学实验动物中心提供。随机留取12只分为正常对照组Ⅰ(C1)和Ⅱ(C2)，6只，分别喂养9周和13周。其余24只大鼠禁食14后，按65 mg/kg剂量，腹腔内注射新鲜配置的1%链脲佐菌素(STZ)溶液(北京博爱科贸有限公司，粉剂，溶于H 4.2的柠檬酸盐缓冲液)，稳定7 测尾部末梢空腹血糖共得到空腹血糖≥16.7 mmol/L的糖尿病模型大鼠21只，随机分为3组，每组7只：糖尿病对照组(T1)，成模后再喂养8周；生理盐水治疗组(T2)，成模后再喂养8周，将生理盐水加入饮用水中，再喂养4周；罗苏伐他汀治疗组(T3)成模后再喂养8周，将罗苏伐他汀片按每只鼠20 mg/kg·d）加入饲料中，再喂养4周。 1.2 方法 1.2.血液生化检查 行坐骨神经传导速度测定前，测尾部末梢空腹血糖，坐骨神经取出后于鼠眼内眦取血测血总胆固醇。 1.2.坐骨神经传导速度(SNCV)测定　各组分别到实验设计的喂养时间时，腹腔注射4%戊巴比妥钠60 mg/kg麻醉大鼠，仰卧位固定后沿右大腿内侧纵向切口，显露分离右后肢坐骨神经干，将刺激电极和记录电极分别置于近侧端和远端，应用MPA多道生物信号分析系统，设定系统参数：输入刺激电极与记录电极之间的距离，频率1000 Hz，放大倍数7501500，硬件滤波10Hz，时间常数0.001 s，刺激强度20 V，观察坐骨神经干复合动作电位的图形，测量动作电位波形并计算传导速度。　 1.2.免疫组织化学检测　大鼠行坐骨神经传导速度测定后，取出右后肢坐骨神经，切成数段，按次序行固定、脱水、包埋成蜡块、切片等程序后，用CD34、血管内皮细胞生长因(VEGF)、内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)单克隆抗体(北京中杉生物技术开发公司)进行神经组织免疫组织化学染色观察。 1.2.4 统计学用SPSS 10.0软件对数据进行分析，所有计量数据均用±s表示，组间差异用t检验以P≤0.05为有统计学差异 2 结果 血糖与血胆固醇STZ腹腔注射周大鼠空腹血糖水平≥16.7 mmol/L，组间血糖水平无差异（P0.05）13周，和组间血糖和血胆固醇水平差异（P0.05），见表。 表1 各组大鼠治疗前后血糖与血胆固醇的比较(mmol/L，±s) 组别 血糖 血胆固醇 9周 13周 9周 13周 21.57±3.84 23.63±2.85 2.90±0.74 3.07±0.70 T3组 22.09±2.76 23.14±2.89 2.97±0.69 2.44±0.36 2.2 SNCV比较 糖尿病大鼠常规喂养8周后经SNCV测定证实已形成严重的周围神经病变，T1与C1大鼠SNCV分别为(15.94±0.85)和(33.76±0.89)m/s，组间比较有统计学差异(P＜0.01)。喂养13周后，C2、T2、T3大鼠SNCV分别为（33.74±1.15）、（15.10±0.90）和（27.70±0.86）m/s，C1与C2组间SNCV比较无统计学差异（P＞0.05）C2、T2、T3SNCV两两比较均有统计学差异(P均＜0.05)神经组织