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高血压的基因治疗 摘 要 用于高血压基因治疗的候选基因包括促进血管舒张的基因以及抑制血管收缩的基因。因此，高血压的基因治疗包括两种途径：一是插人引起血管舒张基因的顺义疗法；二是导人抑制血管收缩基因的反义疗法。本文着重讨论了引起血管舒张的激肽释放酶(KK)基因、心钠肽(ANP)基因以及抑制血管收缩的抗血管紧张素原(AGT)基因、抗血管紧张素受(ATlR)基因、抗血管紧张素转化酶(AcE)基因的作用机理和各自的优缺点。 关键词 高血压 ; 基因治疗：顺义; 反义 近年来随着高血压病因研究的不断深入，对于高血压的治疗从药物种类、剂型，乃至针对病因的个体化治疗，都取得了很大的发展。在传统的药物治疗取得5明显疗效的情况下，基因治疗高血压的研究和应用前景是一个深受国内学者关注的问题。多年来高血压的治疗一直依赖于药物，但现有的降压药物均存在不同程度的副作用和并发症，严重的副作用迫使部分病人放弃治疗。由于高血压为终生性疾病，有效的降压治疗必须每天服用降压药，这也使部分病人难以坚持。而且据调查仅有20％～35％的高血压病人药物治疗取得令人满意的效果。此外，治疗高血压的药物均为外来人工合成品，对于人体而言是一种非生理状态。从生理角度出发，人们更欢迎采用一种生物手段，在保持人体生理状态的同时，又能达到治疗的目的。因此，基因治疗高血压就是这样一种理想的手段。因为基因治疗具有高度的靶组织特性和生物活性，以及疗效的长久性(数日、数周、数月，甚至可达一年或更长时间仍可有效地控制血压)，而且副作用少，可以重复应用。毫无疑问，随着基因治疗研究所取得重大的突破，将为高血压的治疗提供有意义的治疗手段，基因治疗高血压的前景令人鼓舞。 用于高血压基因治疗的候选基因包括促进血管舒张的基因以及抑制血管收缩的基因。因此，高血压的基因治疗包括两种途径：一是插人引起血管舒张基因的顺义疗法；二是导人抑制血管收缩基因的反义疗法(反义抑制)。 顺义基因疗法 高血压的顺义(正义)基因疗法，可采用质粒DNA注射或病毒载体携带的血管舒张基因，如激肽释放酶基因和心钠素基因，通过增强扩血管基因的表达来抗高血压。 激肽释放酶(Kalliktein，KK)基因治疗高血压 研究表明KK基因与血压之间存在遗传连锁关系，KK在血压的调节中起重要作用，其激肽释放酶一激肽系统(KKs)异常被认为是高血压的发病机理之一。wang等对KK基因治疗高血压作了探索，他们将构建的人类组织激肽释放酶质粒DNA，经静脉注入自发性高血压大鼠(sHR)，并应用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)出印迹分析和针对人类组织激肽释放酶基因的酶联免疫吸附试验(EuSA)法证实，KK基因及其mRNA在SHR心、肺、肾表达明显增强，同时sHR血压持续下降达6周，最大幅度达46mmHg，2～3周降压效果最明显。上述降压效应可被皮下注射抑肽酶(Apmtinin)所逆转。之后，Katsu—tos“副等应用腺病毒携带人类组织激肽释放酶基因(Ad．cwV—cHK)对高血压大鼠静脉注射，在注射后一天血压开始下降，降压效果持续超过24天，而对照组注射腺病毒携带细菌Lacz基因(Ad．CMV—Lacz)无上述变化。用RT—PCR Southem印迹法及EUSA法分析鉴定，人类组织激肽释放酶mRNA在肾、心、主动脉和肝表达。在鼠的血清及尿中可以检测到与时间有关的具有免疫活性的KK，从形态学观察左心室重量下降，心肌细胞缩小，肾小球硬化和肾小管扩张被抑制。高血压大鼠肾血流量增加，尿量增加，GFR增加，电解质排除增多。实验表明，组织激肽释放酶可产生广泛的有益的生物学效应，KK基因可能是治疗盐敏感性高血压、心血管疾病的肾脏疾病的重要候选基因。 1．2 心钠肽(Atrial Natriuretic Peptide，ANP)基因治疗高血压 ANP具有扩血管、利钠、利尿和降压作用，提示ANP基因可能在对高血压的治疗中发挥作用。Lin_91等用腺病毒携带人类组织ANP基因(Ad．RsVANP)，对Dahl盐敏感大鼠(Dss)静脉注射，在注射后3天血压开始下降，降压效应维持超过5周，最大降压幅度达32．8mmHg，对照组注射Ad．cMV—Lacz无上述改变。用RT—PCR Southem印迹法及特异性ELISA法进行检测，具有免疫活性的人ANP在心、肺、肾中表达，出现肾血流量、GFR、钠排泄及尿量增加，尿中cGMP增加，提示血压下降可能由于NO刺激细胞内cGMP增加所致；形态学上的心肌细胞肥大、肾小球硬化、肾小管损伤及主动脉增厚出现逆转。 反义基因疗法 目前研究和应用比较多的是反义基因疗法。反义基因疗法指应用反义核苷酸在转录 和翻译水平阻断某些异常基因的表达。反义核苷酸目前可分为三类：(1)将反义寡