实时荧光PCR在诊断艾滋病患者肺孢子菌肺炎应用.pdfVIP

第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 实时荧光 PCR 在诊断艾滋病患者肺孢子菌肺炎 中的应用 田敬华 周淳 张伟 华文浩 万钢 张亮 陈志海 基金项目：“十一五”国家科技重大专项（2008ZX10005- 003G 、2009ZX10005-014 ） 作者单位：100015 首都医科大学附属北京地坛医院传染科 通信作者：陈志海，电子信箱：chenzhihai0001@ 肺孢子菌（Pneumocystis ）是一种条件性致 咳痰，或原有呼吸道疾病症状加重，并出现脓性 病真菌，其具有宿主种特异性[1] 。引起人肺孢子 痰；伴或不伴胸痛。（2 ）发热。（3 ）肺实变体征 菌肺炎（Pneumocystis Pneumonia ，PCP ）的是 9/L 或＜ 和（或）湿啰音。（4 ）WBC ＞10×10 9/L ，伴或不伴核左移。（5 ）胸部X 线检查 伊（或耶）氏肺孢子菌（Pneumocystis jirovecii ）。 4 ×10 PCP 是获得性免疫缺陷综合症（AIDS ）患者和 显示片状、斑片状浸润性阴影或间质性改变，伴 其他免疫缺陷患者主要常见的肺部机会性感染 或不伴胸腔积液。以上 1～4 项中任何一款加第 [2] [3] ，PCP 临床症状严重，病死率高 ，选择一种 5 项并除外肺结核、肺部肿瘤、非感染性肺间质 敏感、特异的诊断方法对 AIDS 合并 PCP 的早 性疾病、肺水肿、肺不张、肺栓塞、肺嗜酸性粒 期诊断至关重要。 细胞浸润症、肺血管炎等，可建立临床诊断。 本 实 验 用 实 时 荧 光 PCR （real-time 入选标准（1）患者HIV 抗体阳性；（2 ）符 fluorescence PCR ） 方法对艾滋病合并肺部感染 合肺部感染诊断；（3 ）年龄：18～65 岁；（4 ） 患者的支气管灌洗液（bronchoalvelar lavage 24 h 内胸片检查不考虑肺结核者；（5 ）无严重心、 fluid ，BALF ）中肺孢子菌 DNA （PCP-DNA ） 肾等重要脏器疾病；（6 ）受试者自愿并签署知情 进行定量检测，探讨实时荧光 PCR 方法对于艾 同意书。 滋病合并 PCP 的诊断价值，同时与六甲基四胺 三、标本收集 银 Gomoris methenamine-silver （GMS ）染色方 支气管肺泡灌洗：在患者情况允许下，采用 法进行了比较。 纤维支气管镜方法采集样本。于要灌洗的叶支气 管注入 2%利多卡因 1ml 局部麻醉后，将纤维支 对象与方法 气管镜前端嵌入段或亚段支气管开口。经纤维支 一、对象 气管镜吸引管推注注射用生理盐水至肺段或亚 北京地坛医院、广州八院 2010 年 1 至 12 段，每次注入后随即负压吸引。灌洗部位：通常 月收治的艾滋病合并肺部感染患者共 60 例。 在右中叶或左舌叶（弥漫性肺病）。当然在胸片 二、艾滋病合并肺部感染的诊断标准及入选 提示明显异常肺段亦可作为灌洗部位。灌洗液一 标准 般用 37 ℃，有助于防止咳嗽和支气管痉挛。每 艾滋病诊断标准：国家艾滋病和艾滋病病毒 次 20