化疗药物抗肿瘤血管作用地研究进展.pdfVIP

全文刊曼 化疗药物抗肿瘤血管作用的研究进展 尹鸣(综述)，陈龙邦(审校) (南京军区南京总医院肿瘤科．南京210002) O引 言 肿瘤生长是血管依赖的，肿瘤通过分泌某种因子促进了内皮细胞的增殖和毛细血管的形成，而新生血 管通过营养控制影响着肿瘤的生长。在缺乏新生血管的情况下，肿瘤将被限制于2—3mm大小的静止状 态。不仅如此，肿瘤血管在肿瘤从良性向恶性的转变，癌细胞进人血液循环，转移灶的发展和破裂中都起 着重要作用。血管生成涉及肿瘤从形成到转移的全过程‘1’。当前，抗肿瘤血管生成正成为抗肿瘤治疗新 的研究热点，已报道的具有血管生成抑制活性的物质有数百种，并且数量还在不断增加。令人感兴趣的是 一些已在临床广泛应用的化疗药物也具有血管生成抑制活性，并且在研究中取得了显著的血管抑制效果． 大量研究结果表明：化疗药物可以成为肿瘤血管床的有效抑制荆，将开辟化疗药物新的应用领域。 l 化疗药物抗血管生成的研究方法及其评估标准． 在过去的10年中，血管生成的研究经历了从细胞培养、动物模型到人体应用3个阶段。概括的说，可 分为体外实验和体内实验。 体外实验‘2’：主要是分离和培养内皮细胞，观察其在外源因素作用下的增殖、迁移和功能变化。这些 实验包括：观察细胞迁移状况的Boyden盒分析法和组织培养皿、胶原基质分析法及观察细胞存活情况的 细胞计数、胸腺嘧啶的掺人、免疫组化标记等方法．体外实验简单、便宜而迅速，能够进行有效的实验控制 和便于观察，但不同实验室使用的试剂、内皮细胞的种类、实验条件和技术的不同加大了横向比较的困难， 更重要的是体外实验结果往往不能有效的推广到体内，因此只适用于初筛。 体内实验： 体内实验更为直接的观察生理条件下药物对血管生长的作用．它首先需要一个合适的宿主，能够较好 的观察微血管的生长状况；其次，这一生长部位还应较少受到宿主本身各种理化因素的影响．以便于实验 结果的归纳和讨论；第三，在需要时，应能方便的进行各项操作．如试剂的添加、肿瘤的嫁接等。具体的方 法有： (1)鸡尿囊绒膜(CAM)分析：这是最便宜、也是应用最广的体内抗血管形成研究方法．将鸡受精卵去 壳孵化，CAM通过一小窗口暴露部分．待测化疗药物预先置人凝胶或纤维素盘中，并在血管生长高峰期 (第7天)植入CAM，考查其抗毛细血管生长能力；肿瘤细胞亦可植人CAM以直接评估肿瘤相关的抗血 管生成作用．CAM分析是一高效的筛选试验，但由移植物引起的非特异炎性反应和对结果精确定量的困 难限制了其应用． (2)角膜分析：角膜是一表浅无血管的透明部位，利于连续观察．在角膜上移植含肿瘤细胞或前血管生 成多肽的小球，观察其促血管生成作用．血管抑制剂可置人小球或定时滴注观察其抗血管生成作用． 就形成一透明无血管的膜，此时可象角膜分析那样植人小球进行试验． 定时间后取出，血管生成的活性可通过测量该处的血流量或血红蛋白含量了解． Matrigel是肿瘤基底膜蛋白的提取物，它在低温下是液态，在注人动物内是凝胶状，待测试剂或肿瘤 细胞可加人液态Matrigel，以后就像DAS那样进行分析． 体内试验较体外试验更为准确和合理．但也更费时、费力．同样，由于缺乏统一的标准，不同实验室问 ·255· 江苏省抗癌协会化疗专业委贝会第五届年会论文汇编 研究成果的比较较为困难。为此，Folkman等人提出了判断抗血管药物疗效的四条标准可供参考：1．化疗 药物杀伤内皮细胞的毒性剂量应低于对肿瘤细胞的毒性剂量；2．化疗药物能干扰内皮细胞功能，但并不使 内皮细胞致死；3．化疗药物能阻滞血管形成的某个关键步骤从而阻止新血管的形成．4．化疗药物具有能在 体内抗血管活性的证据． 2肿瘤血管生成作用的调节机制 体内肿瘤血管的生长是涉及多种激素和酶的多步骤过程，可分为“血管前期”和。血管期”两个阶段，两 switch)。血管前期是指在肿瘤发生的早期，局部几乎元新生 阶段的转化称为血管生成开关(angiogenic 血管的阶段，此时肿瘤半径2mm，主要依靠弥散在细胞周围的氧和营养物质生存；血管期的特点是局部 有大量新血管形成，肿瘤呈指数性生长并向周围组织浸润。血管形成的过程受开关控制，血管形成促进因 子和抑制因子的平衡改变可以激活开关。当血管形成促进因子