高效液相色谱法在天然产物多酚成分分析与鉴别应用.pdfVIP

高效液相色谱法在天然产物多酚成分分析与鉴别中的应用 任凤英 （中国医药集团四川抗菌素工业研究所质量研究部，成都610051 ） 多酚（Polyphenols ），广泛存在于天然产物中，是一类含有酚羟基的生物 类黄酮化合物的总称。在维管植物中，多酚化合物的含量仅次于纤维素、半纤 维素和木质素，分布于植物的皮、根、叶、果，最高含量可达20% 。植物体内 的多酚化合物是植物的次生代谢产物，属于天然有机化合物，某些多酚是人和 动物饮食中不可缺少的重要成分。 多酚化合物具有某些独特的生理作用，其中，最为研究者熟知的是：多酚具有 强烈的抗氧化作用。目前，药理学研究已证实超过4000 种不同的多酚抗氧化剂可以 抵抗导致神经退化性疾病及一些心血管疾病的氧化应激，其生理活性是通过抗氧化 能力排除体内自由基、单线态氧、过氧亚硝基化合物等氧化性危害因子来实现的， 其药理作用主要表现为：降低炎症反应的影响；阻碍肿瘤生成和发展；对抗机体衰 老等。比如：茶叶中的表没食子儿茶素没食子酸脂能有效抑制动物体内活性氧成分 [1] [2] 引起的炎性反应 ；葡萄中的某些多酚成分，能有效抑制肿瘤生长 ；橄榄油中的 [3] 多酚成分能抑制机体衰老 等。多酚还能通过金属螯合物反应抑制体内有害金属离 子的伤害。 上图为镜下观察到巨噬细胞伸出触臂吞没两个粒子。活性氧促进低密度脂蛋白 的氧化，而多酚抗氧化剂抵抗这种发炎反应。 鉴于多酚类化合物对于人体健康的诸多益处，众多机构都致力于天然产物多酚 成分研究之中。对某个化合物生理活性的研究，必然要求分离纯化及分析手段的配 合，但植物体内多酚成分复杂，结构多变，同族化合物和异构体大量存在，很多多 酚类化合物性质不稳定，在分离纯化及分析过程中易变质，这些性质给成分分析带 60 来不少困难，也阻碍了后续研究的脚步，比如在红酒中，就含有超过 种之多的多 酚类化合物。因此，有必要对于多酚类化合物的分析方法进行深入研究和开发。 目前，已有多种分析方法被应用于天然产物多酚成分分析与鉴别中，包括：紫 外色谱、荧光色谱、质谱、电化学检测等。但由于天然产物中多酚化合物的多样性 使得在复杂的多酚混合物中确定单个多酚化合物仍然比较困难，但得益于科技的不 断进步，各种更好选择性及更高灵敏度的分析方法不断涌现，天然产物中多酚成分 的分析鉴别越来越清晰和完善。 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC ）发展至今 100 已有 多年的历史，其高效、高灵敏度、快速、适应性广泛等特点，使其成为医 药品、化学、环保、生命科学、与食品工业等众多领域最重要和必不可少的分析方 法。随着近年来聚合物研究的进展，各种新型的高效液相色谱柱填料不断涌现，除 C18 C8 常用的 键合硅胶， 键合硅胶等，近年来又发展出新型的填料，如：聚苯乙 烯填料、醇基填料等，使得以前难以分离或者分离效果不好的混合物能顺利的分离 鉴别。 得益于色谱技术的进步，天然产物中多酚成分的分析和鉴别也得到了长足发展。 Kensuke Yagi [4] 三井农林株式会社食物研究实验室的 等人 通过高效液相色谱法成 功分离鉴别了苦茶属植物Camellia irrawadiensis[5]中的多酚成分，发现其内含多酚 成分与普洱茶（Camellia sinensis）极为相似，通过液相色谱分离，确定其多酚混合 物中，主要成分为：1,2-di-O-galloyl-4,6-O-(S)-hexahydroxydiphenoyl-b –Dglucose （2 ），同时，还对Camellia irrawadiensis 以及普洱茶（Camellia. sinensis ）、大理 茶（Camellia. taliensis ）中所含的其他多酚成分，如：儿茶酚（catechins ）、山茶多 stri