人工免疫组化判定结果与灰度值相关性.pdfVIP

· 112 · 临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol 2010Jan；26(1) 人工免疫组化判定结果与灰度值相关性 田君才。，杜 国亮 ，张桂霞 关键词：结直肠肿瘤；p21w^；p21 ；灰度值 ；免疫组织化学 个有代表性的区域，拍摄为数码照片，使用图像分析软件对 中图分类号：R735．3 文献标识码：B 所拍照片进行分析，进行相对灰度值的测定，统计上述代表 文章编号：1001—7399(2010)01—0112—02 性区域的灰度值，最后取均值作为代表此例切片染色强度的 灰度值，对与阴性表达的切片，取细胞 内对应抗体阳性表达 免疫组织化学是用特异性抗体显示组织化学成分的重 区域灰度。 要方法，是实验结果以显微图像的形式显示出来 ，目前，对免 1．5 统计分析 采用 spe栅 an等级相关分析灰度与人工 疫组化图像的分析方法主要仍主要为人工分析，该方法简便 判定间的关系，其中(P0．05)为有统计学意义，用 4-s表 易行，对实验的标准化要求不高，但无法做精确的量化分析； 示平均灰度值。所有数据均在SPSS13．0软件上进行统计。 随着计算机的广泛应用，一些学者开始探讨应用计算机图像 2 结果 处理分析免疫组化图像，这种方法在精确性、客观性、分析速 度等方面具有巨大优势，已经成为免疫组化显微图像分析技 2．1 免疫组化人-rN定结果 人工判定结果按照判定标准 术发展的一个趋势，但 目前仍不完善。本研究将采用计算机 判定结果分布见表 1。 图像分析系统测量免疫组化切片灰度，并与人工技术方法相 比较，从而验证灰度测量与人工方法在免疫组化染色结果判 表1 免疫组化结果对 比 定方面的相关性。 1 材料与方法 1．1 材料 收集 自2000年9月～2005年3月的酒泉市人 民医院病理科结直肠癌术后癌组织及癌旁正常组织标本各 A代表切缘组织(下同不再复述) 45例。每例标本连续切2张切片，分别进行p21WAF1，p21 的免疫组化实验。 2．2 p21 ，p2l 灰度测量结果 在结直肠癌组织及癌 1．2 免疫组化 p21 为 鼠抗人单克隆抗体，即用型， 旁组织中p2 表达的图像分析灰度值均值为 132．1-4 p21 为鼠抗人单克隆抗体 ，即用型，以及EliVision免疫组 13．2和 132．6±19．8，分别分布在 104．15—160．32和 化试剂盒，均购 白福州迈新公司。 101．00～181．O0之间(P0．05)。p21 在结直肠癌组织 1．3 人工判定方法 由病理科两位病理学医师在不知试验 及癌旁组织 中表达的图像分析灰度值均值为 164．84-23．4 目的的情况下进行。p21 以细胞核或胞核伴有少量胞质 和 147．9±22．2，分别分布在 112．55～214．45和 98．00～ 出现棕黄色颗粒作为阳性细胞 ，只有胞质阳性视为非特异染 193．38(P0．05)之间。 色。p21“一以细胞胞质出现棕黄色颗粒作为阳性细胞。参 2．3 灰度与人-rN定结果的相关性 分析灰度值与人工分 照文献方法先按染色强度打分：0分为无色，1分为浅黄色，2 析结果间的相关性，发现 p21 ，p21 表达无论在肿瘤组 分为棕黄色，3分为棕褐色，染色强度需与背景着色相对比； 织中还是在正常组织中灰度与人工判定等级负相关。各 自 再按阳性细胞所 占百分比打分：0分为阴性，1分为阳性细胞 相关系数分布见表2。结果表明，本次实验数据与病理学医 ≤10％，2分为 1l％ ～50％，3分为 51％ ～75％，4分为 师的判断比较符合。 75％ 。 1．4 灰度测量 由专人使用数码摄像 (OlympusBH-2多功 表2 各相关系数 比较 能生物显微镜)