晚期糖基化终产物通过其受体促进内皮细胞分泌IL-8的研究.pdfVIP

维普资讯 PIt,Z! … www．pibb．ac．ca 晚期糖基化终产物通过其受体促进 内皮细胞分泌 IL．8的研究 赵善超-)” 刘靖华 )” 宋先璐 ∞ 郭志坚 邓 鹏 2】 刘志强 张 训 侯凡凡 )… 姜 勇2)．．’ ()南方医科大学南方医院肾病研究所，广州 510515；南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室，广州 510515； 旷 州医学院附属肿瘤医院，广州 510095) 摘要 探讨晚期糖基化终产物(AGE)修饰蛋 白对 内皮细胞生成 白介素 8(IL-8)的作用，及晚期糖基化终产物受体(RAGE)在此 病理过程中的作用．内皮细胞来 自培养的人脐静脉 内皮细胞(HUVEC)．将 内皮细胞与不同浓度的AGE修饰人血清 白蛋 白 (AGE．HSA1在体外共同培养，或以可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)对 AGE．HSA进行预处理后再与HUVEC共同培 养 ．用蛋 白质液相芯片法检测 HUVEC培养上清 中 IL-8水平 ，并提取细胞 RNA，进行 RT．PCR反应 ，检测 细胞 中 IL-8mRNA 的表达水平．结果表明，AGE．HSA 以时间和剂量依赖的方式刺激HUVEC生成 IL-8，未经修饰的HSA无此作 用．AGE．HSA用 sRAGE预处理后，刺激HUVEC生成 IL-8的作用被抑制，并且此抑制作用呈剂量依赖的方式．AGE．HSA 刺激 HUVEC使 IL-8mRNA表达增高，未经修饰的HSA无此作用 ．sRAGE能够阻断AGE．HSA诱导 HUVEC表达 IL-8 mRNA的作用．整个变化趋势与蛋白质水平一致．研究首次证实，AGE．HSA与细胞表面受体 RAGE相互作用可刺激 内皮细 胞分泌 IL-8，并上调 IL-8mRNA的表达 ．这为研究加速型血管病变 的发病机制提供 了新视角，也为治疗 由AGE增多和潴留 所引起的病理损害提供了新靶点． 关键词 晚期糖基化终产物，受体，内皮细胞，白介素一8 学科分类号 R631，Q512，Q78 晚期 糖基 化 终 产 物 (advancedglycationend E一选择素等细胞因子，引起病理效应4[1．但 AGE products，AGE)是蛋 白质氨基组与糖的醛基组之间 能否促进 白介素 8(niterleukin一8，几一8)的生成，国内 非酶性糖化氧化反应的终产物[1】．近期的研究证 外均未见相关报告．我们的工作从蛋 白质和基因两 实 ，AGE潴 留在慢性肾功能不全 (chronicrenal 个水平观察AGE修饰蛋 白对 内皮细胞分泌 几一8的 failure，CRF)某些并发症的发生发展中具有重要作 影响，并探讨了RAGE在这一过程中的作用． 用，因此被认为是一类新发现的尿毒症毒素[21．同 1 材料及方法 时，CRF病人也是心血管疾病 的高危人群，这类 病人心血管病的发生率 明显高于一般人群，发病年 1．1 材料 龄 明显提前，被称之为加速型血管病变3[】．然而， RPMI．1640培养基购 自Gibco公司；超级纯胎 这种糖化氧化产物对血管的作用及其分子机制 目前 牛血清(FBS)购 自Hyclone公司；人血清 白蛋 白 还不完全清楚．有研究表明，AGE与其特异性受 体 RAGE (receptor foradvanced glycation end ·国家 重 点 基 础 研 究 发 展 计 划 项 目(973)(2002CB513005 products)相互作用，可促进内皮细胞分泌细胞间黏 2006CD503904)和国家 自然科学基金资助项 目30670829)． 附分子 (intercellularadhesionmolecule，ICAM-1)、 一 共 同第一作者． 血 管 细 胞 黏 附 分 子 ．1(vasculra celladhesion ” ·通讯联系人． molecule．1，VCAM．11、单 核 细胞 趋 化 因子 ．1 侯