链佐星-弗氏完全佐剂制作大鼠糖尿病肾病模型.pdfVIP

维普资讯 南京中医药大学学报 2008年7月第 24卷第4期 ／OURNALOFNANJLNGTCMUNIVERSITYVol…24No．4丛 链佐星 一弗氏完全佐剂制作大 鼠糖尿病 肾病模型 李璇 ，孙雪莹，王琼，孙小玉，李晓冬 ，朱荃 (南京中医药大学中医药研究院，江苏南京 210046) 摘要：目的 探讨建立适合于糖尿病 肾病并发症及其治疗学研究的病理模型制作方法。方法 雄性 Wistar大鼠ip链佐 星30mg／kg，d2每只 ip弗氏完全佐剂(CFA)0．1n1L，链佐星和 CFA均每周 1次，连续3周，血糖稳定升高后给予高脂饲量 喂养达 l4周。l4周后收集尿液、采集血清、制备肾匀浆，测定尿液、血清中与糖尿病肾病相关的指标；HE、PAS染色观察 肾脏病理变化；免疫组织化学染色观察TGF~-1在肾脏中的表达。结果 造模成功后血糖保持 16mmol／L达 14周；模型 动物尿量明显增加 ，尿液24h微 白蛋 白、总蛋白排出量增加，肌酐排出量减少；血清中肌酐、尿素氮、AGEs含量显著升高， 肌酐清除率降低；模型动物体质量明显降低，肾脏质量、肾指数、山梨醇含量、肾组织匀浆中NO含量明显增加；病理组织 学研究表明模型动物肾小球呈分叶状，系膜区增宽，基质明显增 多，分布不均，毛细血管基底膜增厚，唧 一1在肾小球 表达增多。结论 此模型具有糖尿病肾病的特点 ，可作为糖尿病肾病研究的动物模型。 关键词 ：糖尿病 肾‘病 ；山梨醇 ；链佐星 ；弗氏佐剂 中图号：R287．1 文献标识码：A 文章编号：1000—5005(2008)40—0257—04 糖尿病 (diabeticmellitus，DM)的患病率逐年 也得到 DN动物模型呢?作者采用上述造模方 增高，据估计到2003年全球将有4．4％的人 口罹 法，对模型动物与 DN相关指标 (包括血清学、病 患 DN，这必将 伴 随着糖尿病 。肾病 (diabetic 理组织学、免疫组织化学、尿液指标等)进行研究， nephropathy，DN)的高发生率…。在 l9世纪初期， 以期得到DN动物模型。 DN被看作是一种以尿量增多和消瘦为特征的。肾 l 材料 病 ，而现在在世界范围内肾衰病人 中20％～50％ 1．1 药品与试剂 是由DN发展而来 的_1j，慢性 肾病 的治疗手段是 streptozotocin，calbiochem产品；FREUND’sAD— 血液透析、肾脏移植或腹膜透析l，90％以上的肾 JL厂vANT，氨基胍，山梨出脱氢酶 (SDH)，D．Sorbitol 病患者生活在发展 中或不发达国家，这些治疗手 ， sigma产品；优越血糖试纸及血糖仪，购 自美国罗 段对他们来说很难获得l4j，所以DN的病因病机 氏诊断公司；葡萄糖测定试剂盒，购 自上海荣盛生 及预防治疗 日益成为诸多学者关注和研究的热 物技术有限公司；尿素氮、一氧化氮(NO)、肌酐试 点，适合于 DN研究的动物模型在此领域中起着 剂盒，购 自南京建成生物工程研究所 ；尿微量 白蛋 十分重要 的作用。 白测定试剂盒，购 自南京聚力生物医学工程研究 本实验室 曾报道采用小剂量多次注射链佐星 所 ；NADH，辅酶 I，购 自中国医药 (集 团)上海化学 (streptozocin，STZ)联合弗 氏完全佐剂 (Complete 试剂公司；甘氨酸，购 自上海康达氨基酸厂；组织 Freund’sadjuvant，CFA)同时辅 以高脂饮食 ，延长 转化生长 因子 J3—1(TGFI3—1)，CantaCruz产 品；二 观察周期达 l2周造成大 鼠DM 眼病并发症模 抗，购 自晶美生物工程有限公司；DAB显色系统 ， 型_5J。DM眼病和DN同属于DM微血管病变，发 GeneTechBiotechnologyCompanyLimited产品；枸 病机理有很大的相似之处，那么用上述方法能否 橼酸，枸橼酸钠等化学试剂均为