ELISA测定乳中磺胺甲基嘧啶残留.pdfVIP

中国兽医学报990221 中国兽医学报 CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE 1999年 第19卷　第2期 No.2 vol.19 1999 ELISA测定乳中磺胺甲基嘧啶残留 * ** ** 吴　定　张羽航 　姚汝华 摘要　以牛血清白蛋白(BSA)为载体，合成2种不同的物质的量的比值(约1∶13和1∶42) 的磺胺甲基嘧啶抗原，并比较了两者的免疫原性；以卵白蛋白(OA)为载体，合成1种 包被抗原；用辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG，工作浓度1∶1 000； 建立的乳中磺胺甲 7 7 （1∶42）和3.21×10 基嘧啶残留ELISA测定法，抗原亲和常数分别为1.28×10 －8 －7 (1∶13)，磺胺甲基嘧啶检测质量浓度为5～220 μg/L(1.87×10～8.2×10 mol/L)， 检测限为2.4 μg/L, 回收率为88%～118%，与磺胺二甲基嘧啶和磺胺噻唑交叉率分别为 6.0%和0.84%，与磺胺二甲氧嘧啶和磺胺脒无交叉反应。 关键词　乳　磺胺甲基嘧啶　ELISA 中图分类号　S854.43 * * Wu Ding　Zhang Yuhang　Yao Ruhua　(Anhui Agrotechnical 7 7(1∶13), was 1.28×10 -8 -7 -8.2×10 L (1.87×10 　　Key words 　　磺胺甲基嘧啶是治疗奶牛疾病和作饲料添加剂的常用药物之一。奶牛使用抗生素 ［1］ 后，一般经72 h就可挤乳出售 。但磺胺甲基嘧啶半衰期较长，72 h后鲜乳中仍有微 ［2，3］ 量残留 。食用含磺胺甲基嘧啶的牛乳，能导致过敏机体发生过敏性反应，破坏 ［4］ 机体正常菌群生态平衡，引起致病菌产生耐药性 。乳中抗生素残留的测定一般采 ［5～7］ 用TTC法和微生物抑制圈法，但不适合乳中磺胺药残留测定 。本研究在合成牛 血清白蛋白-磺胺甲基嘧啶抗原和卵白蛋白-磺胺甲基嘧啶抗原，并在比较2种不同分子 file:///E|/qk/zgsyxb/zgsy99/zgsy9902/990221.htm（第 1／5 页）2010-3-23 16:43:25 中国兽医学报990221 结合比偶合抗原免疫原性的基础上，建立了乳中磺胺甲基嘧啶残留的ELISA测定方法。 1　材料与方法 1.1　主要试剂与仪器　磺胺甲基嘧啶(SMD)(山东第四制药厂)、吡啶(上海化学试剂 厂)、丁二酸酐(SA)(上海化学试剂厂)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺(EDC) (Merck公司)、N，N′-二甲基甲酰胺(上海化学试剂厂)、牛血清白蛋白(BSA)(上海生 化所)、卵白蛋白(OA)(上海血研所)、辣根过氧化物酶(HRP)(RZ3.0，上海生化所)、 羊抗兔IgG(天津生物制品研究中心)、硼氢化钾(Fluck公司)、过碘酸钾(上海试剂一 厂)、3，3′，5，5′-四甲基联苯胺(Sigma公司)。 　　UV-754型紫外可见分光光度计(