四种常用的人中性粒细胞分离方法的比较.pdfVIP

维普资讯 第 28卷第4期 国际病理科学与临床杂志 V01．28 No．4 2008年 8月 InternationalJournalofPathologyandClinical Medicine Aug． 2008 · 论 著 · 四种常用的人中性粒细胞分离方法的比较 李金凤 ，刘文礼，史小娟，刘伟，汉建忠，万静，罗 自强 (中南大学湘雅医学院生理学教研室，长沙410078) [摘要] 目的：比较Percoll非连续密度梯度离心法、Ficoll—Hypaque密度梯度离心法、裂解红细胞法和Dextran 作用下红细胞 自然沉降法四种常用的人中性粒细胞分离方法。方法：取健康人外周静脉血，分别采用以上四种方 法进行中性粒细胞分离，对其细胞纯度、回收率、存活率进行 比较。结果：Percoll非连续密度梯度离心法与 Ficoll- Hypaque密度梯度离心法分离得到的细胞纯度均大于90％，两者间比较无统计学差异 (P0．05)；裂解红细胞法和 Dextran作用下红细胞 自然沉降法分离得到的细胞纯度略低于 Percoll非连续密度梯度 离心法 (P0．01)与 Ficoll— Hypaque密度梯度离心法(P0．05)。Dextran作用下红细胞 自然沉降法的回收率低于Percoll非连续密度梯度 离 心法(P0．01)、Ficoll—Hypaque密度梯度离心法(P0．01)和裂解红细胞法(P0．05)；Percoll非连续密度梯度 离 心法回收的中性粒细胞存活率明显高于Ficoll—Hypaque密度梯度 离心法(P0．05)，裂解红细胞法 (P0．01)和 Dextran作用下红细胞 自然沉降法(P0．01)。结论 ：Percoll非连续密度梯度离心法分离中性粒细胞 ，纯化程度好 ， 回收率高，是一种简单、高效的中性粒细胞分离方法，适于临床和科研 中广泛应用。 [关键词] 中性粒细胞； Percoll非连续密度梯度 离心法； Ficoll—Hypaque密度梯度 离心法； 裂解红细胞 法： Dextran红细胞沉降法 [中图分类号] R331．1 [文献标识码] A [文章编号] 1673—2588(2008)04-0277-05 Comparisonof4 popularmethodsforneutrophil isolationfrom humanperipheralblood LIJin-feng，LIUWen—li，SHIXiao-juan，LIUwei，HANJian—zhong，WANJing，LUOZi—qiang (DepartmentofPhysiology，XiangyaSchoolofMedicine，CentralSouthUniversity，Changsha410078，China) [Abstract] Objective Percolldensitygradientcentrifugation，Ficoll—Hypaquedensitygradien centrifugation，redblood cellscrackingand naturalerythrocyte sedimentation method with Dextran， whichare4frequentlyusedmethodsforneutrophilseparationfrom human peripheralblo