限磷条件下光合细菌对小球藻生长的影响探讨.pdfVIP

中国水利发展中心 第四届全国江河湖库永质监测及水体富营养化控制高级研讨会 蛋白核小球藻(Chlorella叫Igaris)，购自中国科学院武汉水生生物研究所淡水藻种库。以下简称 小球藻。 1．2实验方法 、 1．2．1小球藻培养 在无菌条件下，将小球藻接种于SE培养基中，以(25±1)℃的温度，12L：12D的光暗比条件于光照 培养箱中培养，定时摇动。试验前，将其进行无磷化处理。根据各组试验需要接种后扩大培养一周并饥饿 培养3天，消耗藻种体内蓄积的营养物质，该藻液即可作为试验藻液。 1．2．2光合细菌培养及菌悬液的制各 瓶中装入光合细菌培养基，接种20％～30％的光合细菌菌液，在30℃、光照为50001ux条件下培养数 天至菌液为棕红色。 试验前将培养5天的光合细菌悬液在无菌条件下10000r．min。1离心lOmin，沉淀生理盐水洗净后再离心， 如此重复3次。用无添加磷的SE培养基配成0D680为2．6菌悬液用于试验。 1．2．3试验用水的配置 的磷营养液，分别配成含磷量为0．7mg／L和1．2mg／L两个浓度的试验原水。 1．3实验设计 按‘城市污水再生利用景观环境用水水质标准(GB／T1891-2002)》要求。再生水中的总磷达到0．5～ 1mg／L就可以作为一般景观用水。本课题组前期对以再生水为主要补水水源的河流水体进行长期监测表明， 其总磷的变化范围在0．374—1．437mg／L之间。综合研究，试验确定分别选取总磷为O．7mg／L(低浓度)和 1．2mg／L(高浓度)两种条件下，将小球藻和光合细菌进行混合培养，研究光合细菌对小球藻生长的影响。 实验时藻密度控制在8．38X 105cell／mL，每组取220mL藻液装入500ⅡlL锥形瓶，实验组每组加入0D。 包括2个处理，纯种培养小球藻和藻菌混合培养，分别在TP为0．7mg／L和1．2mg／L两个浓度范围下进行， 每个浓度条件下设置对照组，且每组设置2个平行样。试验周期为15天，定时取样测定藻细胞密度、pH、 TP、TOC、TN，10天后定时取样测定OD。。 1．3指标检测方法 1．3．1 PH、TP、ToC和TN检测方法 pH值采用ExStik系列便携式测定仪。TP采用过硫酸钾消解一钼锑抗分光光度法“叫测定，TOC、TN均采 N／C 用德国耶拿multi3100型快速测定仪。 1．3．2藻细胞浓度的测定 隔天定时取imL藻液，采用xB—K-25型血小球计数板，以显微镜视野法进行计数。每个样品计数2次， 取平均值。 1．3．3 oDm的测定 对同样成分的培养基而言，光密度值在一定程度上取决于细胞密度。据彭卫民等“31的研究，藻细胞密 度与悬浮液的吸光度具有良好的线性关系．本研究以藻的悬浮液吸光值作为藻的生物量(藻浓度)的度量标 195 中国水利发展中心 第四届全国江河湖库水质监测及水体富营养化控制高级研讨会 准。对藻液进行紫外可见分光光度计全波长扫描，发现小球藻的吸收光谱在波长663nm处出现最强吸收峰， 因此确认其最大吸收波长为663nm。 1．4数据处理方法 根据藻密度计算相对抑制率。藻类的相对抑制率计算公式如下“”： IR(％)=(1--N／No)X100 其中，IR为相对抑制率，N为加入光合细菌实验组的藻密度(cell／mL)，No为对照组藻 密度(cell／mL)。 2结果与讨论 2．1光合细菌对小球藻生长的影响 ，、1200 { ∞1000 苦∞o 城 、-，600 越 稚400 霉 恩200 臻 0 0 2 4 6 8 培养时间(d) 图1不同磷浓度对蛋白核小球藻生