抗肿瘤免疫的研究的体外检测指标①.pdfVIP

高瑞娟等　抗肿瘤免疫研究的体外检测指标　第2 期 1·51 · ·专题综述· 抗肿瘤免疫研究的体外检测指标① ② ( ) 高瑞娟 　丁 　巍 　王 　丽 　 东北师范大学遗传与细胞研究所 ,长春 130024 　　中国图书分类号 　R73051 　　文献标识码 　A 　　文章编号 　1000484X( 2005) 　　随着分子生物学及相关技术的发展 ,肿瘤的免 检测的指标。 疫治疗已成为当前令人关注的研究领域。在机体抗 11 　铬释放实验 　经典的细胞毒活性测定方法为 肿瘤免疫中 ,各种淋巴细胞都有可能发挥作用 ,但大 铬释放法 ,许多肿瘤免疫治疗的临床试验都用该法 量研究表明 , T 细胞扮演着最重要的角色 , 尤其是 来测定 CTL 反应1 ,2 , 我们实验室用噬菌体展示的 + ( ) + ( ) CD8 细胞毒性 T 细胞 CTLs 和 CD4 辅助 T 细胞 肿瘤抗原 MAGE1 多肽表位 EADPTGHSY 免疫黑色 ( Th) ,前者可识别肿瘤细胞表面被 MHC Ⅰ类分子递 素瘤小鼠后 ,利用铬释放实验检测了 CTL 活性 ,表 呈的抗原多肽 , 导致肿瘤细胞裂解 ; 后者可使 CTL 明噬菌体展示的多肽表位在小鼠体内诱导产生了强 前体细胞增殖 ,产生大量效应细胞。所以在肿瘤免 ( ) 烈的 CTL 反应 未发表 。铬释放实验在决定 CTL 疫治疗中 ,检测 CD8 + CTL 反应和 Th1 型 CD4 + T 细 活性高或低以及阳性及阴性方面很有用 ,但存在一 胞的数目和功能是评价疗效的关键。 ( ) 些不足 : 1 铬有放射性 ,不利于安全操作及废物处 尽管免疫治疗的最终评价标准是临床疗效 ,但 ( ) 置 ;而且自发释放率高 ,半衰期短 278 天 ,无法用 由于其长期性和复杂性,不可能每种药物都进行大 于需多次测定的动物试验 ; (2) 不是定量分析 ,操作 规模临床试验 ,需要选取一些中间指标进行初步评 步骤多而细胞共育时间短 ,不能在单细胞水平进行 价。选择指标时需要考虑的因素有 :该方法在检测 测定 ; (3) 从效应细胞角度而言 , 由于从外周血中直 免疫反应时的特性 ; 阳性结果的判断标准;是否能真 接得到的效应细胞很少 ,需进行多次体外刺激 ,可能 实地预测临床结果。传统上通过检测细胞毒活性、 会导致 T 细胞的组成及活性与体内状态不同3 ;从 细胞增殖活性、单核细胞群分泌的细胞因子总量来 靶细胞方面考虑 , 由于自体肿瘤很难得到,不得不经 评价机体的细胞免疫反应水平 ,这些方法的共同特 常使用一些替代靶细胞 ,如 HLA 配型相同的异源肿 点是 ,效应细胞都需要在体外致敏 ,再培养 3～7 天 瘤细胞系或可负载目标抗原的细胞 ,实验结果可能 后进行测定 ,所以都不能检测外周血中前体细胞的 不会反映体内 CTL 细胞的真实活性4 ; (4) 与临床结 数量。目