三链形成寡聚核苷酸反基因作用机理.pdfVIP

《生命的化学》 年 卷 期 — — 2002 22 1 27 文章编号： （ ） 1000-1336 2002 01-0027-02 三链形成寡聚核苷酸的反基因作用机制 李细清 周智兴1 1 （中国科学院生物化学与细胞生物学研究所，上海200031；江西省宜春医学院微生物教研室，宜春 336000 ） 关键词： ；反基因；作用机制 TFO 中图分类号： Q52 年 等发现一条 链 酶的招募，与 ， 等的结合位点重叠 1957 Felsenfeld Poly A SP1 NF- B k 能跟两条Poly U 链形成三螺旋，这是三链形 时能阻止这些因子对启动子的活化。 成寡聚核苷酸（ ， 以前的试验很多是体外或用质粒瞬时转 triple-forming oligonucleotide ［］ 1 TFO）研究的开始 。随着 DNA 合成技术的 染细胞进行的，细胞内DNA 处于染色质的结 进展，人们能合成各种序列的寡聚核苷酸。 构中，且受DNA 修复系统等因子的作用，虽 ［］ 2 1987 年Le Doan 等 发现聚嘌呤或聚嘧啶寡 然在许多无细胞系统中，三螺旋的形成被成 聚核苷酸能序列特异地结合于同聚嘌呤/ 同 功地运用，在细胞中也见到TFO 引起内源的 聚嘧啶DNA 双链的大沟内，识别的机制包括 质粒载体和染色体区的位点特异性地突变， 形成Hoogsteen 和反 Hoogsteen 氢键。现在常 表明TFO 体内确实有与靶双链形成三链的， 用的包括含（、），含（、）或含（、）的 G A G T C T 3 但TFO 引起基因抑制的明确机制还有待进 种TFO 以及它们的类似物。人们根据 TFO 一步研究。 能序列特异的识别双螺旋DNA，从而可能影 2 . 阻断转录的延伸 响基因的转录而发展出反基因战略。 转录区比启动子区序列长得多，如果能 1 . 抑制蛋白质在启动子区的结合 阻断转录的延伸，则大大扩展了TFO 的作用 ［］ 在真核生物中，转录因子与启动子区的 范围。 5 用一个 聚寡核苷酸（ Young 15 5- 解离常数在 10 - 8 mol/ L 左右，和 TFO 与靶 TMTMMMMTMMTTMMM-3，其中 为 甲基 M 6- - 的解离常数相当， 能和转录因子竞 DNA TFO 氧代 脱氧腺嘌呤，与 形成碱基三联 8- -