人胚胎干细胞建系的研究现状和存在的问题.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( ) ! *’ )# 年 月 #$$# % !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,-./ #$$# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人胚胎干细胞建系的研究现状与存在的问题 孟国良 尚克刚 丁明孝 （北京大学生命科学学院，北京 !$$1!） 摘 要 人胚胎干细胞系的建立，对人类胚胎发生和人类发育生物学研究、人类新基因的发现和功能研究以及基 因治疗、细胞和组织的移植治疗等领域的突破性进展具有重大意义；回顾了人胚胎干细胞建系研究的历程，就建系 的几种方案、路线、意义和可行性进行了探讨；详细系统地说明了迄今为止建立人胚胎干细胞系所需要的饲养层类 型、培养基组成、添加细胞因子种类及其作用；分析了建立和维持人胚胎干细胞系所需消化酶的种类及其作用以及 目前常用的几种传代方法；从若干方面总结了人胚胎干细胞系的鉴定方法，并对建立和维持人胚胎干细胞系中存 在的若干问题进行了剖析，提出了目前急待解决的问题。 关键词 人胚胎干细胞，人胚胎生殖细胞，多能性，分化，端粒酶 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） !% ? !$$$0%$5! #$$# $#0$!%!0$6 ［ ］ 小鼠胚胎干细胞（ 细胞）系的建立，为其它动物及人 资源!5 G #$ 。 7@ 类胚胎干细胞的分离和体外培养开辟了通道。自!A! 年英 上述各项重大研究的基础在于体外分离、培养永恒增殖 ［］ 国剑桥大学的7B,:C 和D,EF8,: ! 以及美国加州大学旧金山 的、具有多能或全能性的人胚胎干细胞系。到目前为止，有 ［］ ［ ， ， ］ 分校的+,-=9: # 用不同的方法成功分离、建立了小鼠胚胎干 关人 细胞建系成功的报道仅有 例!2 !6 #! ，用于建系的 7@ % ［ ］ 细胞系以来，人们先后建立了鱼类、鸟类、哺乳动物% G !% 以及 培养系统还不够完善，建系和培养过程中还存在不少问题。 ［ ， ］ 人类的 细胞系或类 细胞系!2 !6 。 这些问题的存在限制了人 细胞的研究和应用，因此进一 7@ 7@ 7@ ［ ］ !AA 年，美国威斯康星大学的3/’8C’: !2 和霍普金斯大 步完善人7@ 细胞的培养系统已成为当务之急。