细菌纤维素微球固定化α-淀粉酶地研究.pdfVIP

2Ol1年 1月 四 J 大学学报 (自然科学版) Jan．2011 第48卷 第 1期 JournalofSichuanUniversity (NaturalScienceEdition) Vo1．48 No．1 doi：103969／j．issn．0490—6756．2011．01．038 细菌纤维素微球 固定化 一淀粉酶的研究 赵 昆 ，张 良。，沈才洪 ，胡 承 (1．四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064； 2．泸州老 窖股份有 限公 司，泸州 646000) 摘 要：由本 实验 室分离保存 的葡糖醋杆菌 (Gluconacetobacterintermedius)G一29摇瓶培养 产生的细菌纤维素微球作为载体 ，采用戊二醛交联法 固定化 一淀粉酶．通过正交实验确定 了 固定化的最佳条件 ：pH 6．4，3 戊二醛浓度 ，给酶量 12．5mL(1mg／mL)，固定化时间 12h． 研 究了固定化酶的性质 ，与游离酶相 比，一淀粉酶经细菌纤维素微球 固定化后 ，抗酸碱 和温度 变化的能力提高，最适 pH 向酸性 区偏移 0．4个单位 (从 6．0降到 5．6)，最适温度升高 1O℃ (ak60℃升高到 70℃)，并在较宽的 pH和温度范围内也能保持较 高的活性 ，保藏性和重复使 用性较稳定，说明细菌纤维素微球在工业上作为酶载体支持物有较大潜力． 关键词 ：细菌纤维素微球；a一淀粉酶；固定化 ；戊二醛 中图分类号：Q93 文献标识码 ：A 文章编号：0490—6756(2011)01—0213—06 Imm obilizationof 一amylaseonbacterialcellulosepellets ZHAOKun ，ZHANG Liang2，SHEN Cai—Hong2，HU Cheng、 (1．KeyLaboratoryofBio—resourcesandEco—environmentofMinistryofEducation， CollegeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China； 2．LuZhouLaoJiaoCo．，Ltd，Luzhou646000，China) Abstract：BacterialcellulosepelletswereproducedinshakingflasksbyGluconacetobacterintermediusG一 29whichwasisolatedandpreservedbyourlaboratory．Activatedbacterialcellulosepelletsbythemeth— odofg1utara1dehydecross—linkingwereusedasthesupportof口一amylaseforitsimmobilization．Theop— timalconditionsforimmobilizationweredeterminedbyorthogonalexperiment，theresultwasasfollow— ing：pH 6．4，3 ofglutaraldehydeconcentration，12．5mL(1mg／mL)ofenzymeamount，12h．The propertiesoffreeandimmobilizeda—amylasewerealsoinvestigatedandcompared：theoptimalpH ofim— mobilizeda—amylasewasdescendedby0．4totheacidregion (from 6．0to5．6)andtheoptimaltempera— turewas7Ooc，10oC higherthanthatoffreea—amylase；immobilized —am