泛素活化酶E1抑制剂PYR41对AngⅡ诱导树突状细胞活化影响及机制及研究.pdfVIP

II诱导树突状细 泛素活化酶E1抑制剂PYR41对Ang 胞活化的影响及机制研究 博士研究生：陈晨导师：杜杰首都医科大学附属北京安贞医院 【摘要】 背景高血压是常见的心血管疾病之一，可引起心肌重塑(包括纤维化，炎 症反应和心肌肥厚)和心脏衰竭。近些年来的最新研究结果表明：高血压是一种陧性低级别 的炎症性疾病。适应性免疫反应，尤其是T淋巴细胞介导的细胞免疫反应在血管紧张素II II)诱导的高血压病中起重要作用。树突状细胞(dentriticcells，Dcs)是分布于 (Ang 外周组织及循环中功能最强大的抗原递呈细胞，体内大部分DC处于未成熟状态，可被多种 病原微生物、细胞因子和内源性配体等激活转变为成熟DC，活化的成熟Dc可以促进T细胞 的增殖、分化开启适应性免疫应答反应。因此，Dc的成熟和活化是激活naiveT细胞的必 要条件。 肾素一血管紧张素系统(RAS)中最活跃的肽—AngII是维持和升高血压的关键因子， 它不仅是一种血管活性物质，可引起血流动力学改变，导致高血压的发生；更为重要的是近 年来的有关研究表明它还作为一类炎症因子在炎症、自身免疫及衰老过程中起重要作用。已 B、 有文献报道AngII可以促进Dc的迁移、成熟和抗原递呈能力，现有研究结果表明NF—K II MAPKs和sTATl信号通路对于调节LPS诱导的Dc成熟和活化起到了重要作用。但有关Ang 诱导的Dc成熟和活化的机制迄今为止研究较少。 树突状细胞从造血干细胞发育而来，在其发育和成熟过程中具有明显的形态和功能上的 变化，势必伴随着大量蛋白质的合成和降解。泛素一蛋白酶体途径(UPS)是细胞内代谢蛋 白质最重要的途径：泛素分子通过泛素活化酶(E1)、泛素结合酶(E2)、泛素一蛋白连接酶 (E3)选择性与靶蛋白结合，最后为26S蛋白酶体识别和降解，它在体内细胞内吞、细胞凋 亡、细胞周期、信号传递等许多方面都起着重要作用；除了蛋白酶体介导的蛋白降解，泛素 化蛋白还可以通过降解非依赖的方式在DNA修复和蛋白激酶活化过程中发挥作用，从而参与 体内多种生理和病理过程的调节。已有研究表明人DC的成熟和活化伴随着细胞内UPs成员 的重构；而NF—KB、MAPKs信号通路的上游抑制性蛋白IKBa和Ⅷ(P—l又是蛋白酶体降解 的代表性蛋白底物，同时TRAF和NEMO／Il(I(Y的泛素化又可以通过降解非依赖的方式激活 NF—K B信号通路。提示UPS可能通过NF—KB和MAPKs信号通路参与AngII诱导的DC成熟 和活化过程中。其中，E1是整个过程的起始步骤，也是限速步骤，它直接决定目的蛋白能 否被泛素化。最新研究结果表明E1可以作为治疗恶性血液病的重要靶点。El抑制剂PYR41 可通过抑制NF—KB信号通路的活化和p53的降解激活肿瘤抑制子的转录活性。然而，有关 E1在Dc活化过程中的作用并不清楚。 我们假设：泛素活化酶E1在血管紧张素II诱导Dc成熟和活化过程中发挥重要作用， 其具体分子机制可能与E1启始的泛素蛋白酶体系统介导的Dc成熟和活化过程相关信号通路 I 关键靶点蛋白的泛素化修饰相关。本研究通过采用E1抑制剂PYR4l探讨E1在AngI诱导 Five—eon氧n静nt}州em隶缸鞠alo∞fefenceonea州ma鑫c越暑F0醅ea肇e and An抽毫n 3垂YearAnniV孽rs矗ry鲋eeti冉g。f8e枷g H口sp妇}矗茄㈨耐fo capbf酗列ic覆}unlver$撞y 一528一 II介导的心血管疾病 Dc活化过程中的作用和潜在分子机制，为临床应用Dcs开展针对Ang 提供了理论和实验指导。