高可溶性A_融合蛋白的表达_纯化与鉴定.pdfVIP

2010;30(3) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 447 · · 高可溶性A 融合蛋白的表达 纯化和鉴定 β 、 朱 瑞 郑传东 王 方 南方医科大学神经生物学教研室 广东广州510515 ， ， （ ， ） 摘要 目的 在大肠杆菌中表达阿尔茨海默病 AD 相关肽段A 与具有强助溶作用的麦芽糖结合蛋白 MBP 的融合蛋 ： （ ） β （ ） 白 从而经济有效地获得具有天然免疫原性的A 肽段 为深入研究AD 的发病机理和治疗药物提供重要的物质基 ， β ， 础 方法用PCR 法扩增A 的基因片段 并将其插入到含有麦芽糖结合蛋白的融合表达载体pMAL-c2 中 经测序后 。 β ， ， 再将重组质粒转化入大肠杆菌 TB1 中进行诱导表达 经多聚麦芽糖亲和色谱的纯化获得MBP-A 融合蛋白 再用 。 β 。 SDS及Western blotting 鉴定A 及其融合蛋白的表达和免疫原性 结果测序结果证实插入的DNA 片段与 β 。 序列一致 电泳显示 融合蛋白被高效表达 结果表明 及其融合蛋白可被其特异 Aβ 。 SDSAβ 。 Western blotting Aβ 性抗体识别 结论在大肠杆菌中高效表达了可溶性的A 融合蛋白并经纯化和酶解后获得了A 纯肽段 为AD 病机 。 β β ， 理的研究及其病理模型的建立提供了物质基础。 关键词 阿尔茨海默病 APP A 原核表达 融合蛋白 ： ； ； β ； ； 中图分类号 R338 文献识别码 A 文章编号 1673-4254 2010 03-0447-04 ： ： ： （ ） Expression, purification and identification of Aβ fusion protein with enh