拉米夫定和苦味叶下珠联用对HBVDNA聚合酶的影响.pdfVIP

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2015-07-20 发布于安徽
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拉米夫定和苦味叶下珠联用对HBVDNA聚合酶的影响.pdf

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DNA 拉米夫定与苦味叶下珠联用对HBV 聚合酶的影响王磊。陈正爱’ (延边大学医学部基础医学院，吉林延吉133000) 【摘要]取30、3、0．3、0“s／na浓度的苦味叶下珠分别与相同浓度的拉米夫定联用于被内生聚合酶反应液悬浮的HBVDNA中，根据延长链中同位索放射强度不同，检测二者联用对HBVDNA聚合酶的影响。结果显示，单用30 DNA聚合酶抑制率分别为43．O％和1．0％，二者联用时 v,,／ml拉米夫定及单用30v．：／mi苦味叶下珠的HBV HBV DNA聚合酶抑制率高达71．O％。提示苦味叶下珠对拉米夫定抑制HBVDNA聚合酶有协同作用。【关键词】苦味叶下珠；拉米夫定；正嗜肝DNA病毒属DNA聚合酶【中图分类号】R978[文献标识码】 B [文章编号】 1002-266X(2007)34-0032-02 目前，临床治疗乙型肝炎(乙肝)多采用联合治 1．2．3测定HBVDNA聚合酶抑制率用细胞收集疗。研究显示，联用苦味叶下珠、拉米夫定治疗乙肝仪将被内生聚合酶反应液悬浮的乙肝病毒收集并点 mM 的转阴率明显强于单用拉米夫定…。为探讨联用苦人WhatmanDE81滤纸上。0．5Na2HP04清洗滤味叶下珠、拉米夫定对HBVDNA聚合酶的影响，纸两次(每次3min)，95％EtOH清洗一次(10rain)， 2006年，我们进行了相关研究。现报告如下。 80℃烤箱烘干，冷却后加入闪烁液(0．5％PPO、 1材料与方法 1．1材料及试剂苦味叶下珠干粉(吉林省中医中度(cpm)。将苦味叶下珠30．O、3．0、0．3、0v#ml浓药研究院提供，纯度95％，以三蒸水配制成10me,／度分别与4个相同浓度的拉米夫定作用。计算HBV DNA聚合酶抑制率。HBVDNA聚合酶抑制率=(给 Ⅱll，高温灭菌30rain)，拉米夫定粉剂(军事医学科学院提供，纯度95％)。HepG2．2．15细胞株(军事医 1．2．4统计学方法采用Excel2003统计软件，进学科学院提供)，MEM培养液(Gibeo公司)，胎牛血行t检验。清(Hyclone公司)，3-巯基乙醇、内源性DNA聚合酶 2结果激活剂(BDH公司)，未标记核甘酸dATP、dGTP、 dCTP(北京鼎国生物技术有限公司)。细胞收集仪、苦味叶下珠与拉米夫定相同浓度作用的HBV 微板液烁仪(PerkinElmer公司)。 DNA聚合酶抑制率见表1。表l显示，随着苦味叶 1．2方法下珠浓度降低，其联合拉米夫定的抗HBVDNA聚合 d，酶作用逐渐递减。 1．2．1收集乙肝病毒HepG2．2．15细胞培养4 500 表1 苦昧叶下珠与拉米夫定相同浓度作用的收集上清，1 r／rain离心5rain，lml／管分装到4 HBV DNA聚合酶抑制率(％) 个EP管中，加入聚乙二醇100m#na沉淀病毒过苦味叶下珠拉米夫定(彬柚) 000 夜。14 r／rain离心10min收集病毒。