日本血吸虫RNA聚合酶转录因子SⅢp15真核正反义表达载体的构建与鉴定.pdfVIP

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一 ChinSchistoControl2002,Vol14.No.2 中国血吸虫病防治杂志2002年第14卷第2期 J 6661t2002 [文章编号]1005 ·论ag-· 日本血吸虫RNA聚合酶转录因子SIIbpl5 真核正反义表达载体的构建和鉴定 包俊荚.吴忠道t徐劲,余新炳 [摘要] 目的构建H本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录延长因子S$-pi5真核正反义表达载体,为进 一步鉴定该因f的生物学功能奠定基础。方法采用表达序列标签法从日本血吸虫成虫eDNA文 库中获得了1个RNA聚合酶转录因子(s睢p15)全长eDNA序列,克隆及序列测定后.将设片段正 向_殳反向插人到真核表达载体pcDNA3中。重组载体采用氰苄青霉素LB培养基筛选、双酶切、PCR 盟测序鉴定。结果经鉴定,smpl5-pcDNA3真榱一反义表达载体构建成功。结论构建成功SⅢ P15--pcDNA3真核TF反义表达载体.为下‘步鉴定其生物学功能奠定基础。 L关键词] 同本血吸虫;转录延长因子sIpI5;反义RNA:真核表达载体 24 『中图分类号]R383 [文献标识码:A (1¨NSI.RUCl’IoNUFSENSEANDANTISENSEEUKARYOTICRECOMBINANTPLASMIDSEX PRESSINGS RNAPOt。YMERASEII FACTOR IRANSCRIPTIONSⅢ一P15 i Bao.1unying.U,“ SunYatsenU Zhongdao-x“lin,YuXInblng P.Jn、itologyt ntpersity‘}|Medical Depa,协l㈣|ti h,r”“,t 510089,(1hina Guangvhou Toconstructthesenseandantisenseeuka recombinantcx- [Abstract]Objective ryotic plasmids Thefull novel RNA factor 8.Methods eDNAse pres:slngS.J gene polymeraseⅡelonginS[gpl ofS RNA I factor 5wasobtainedESTstratP quence polymerasetranscription SE-p1 by J elongin wasinserted inlosenseandanliscnse recombinant st— gY.Thefragment eukaryoric plasmidsbydige tnⅡwithrestrictiveand reaelionsThe dunewasscreenednnLB enzymes linking positive plales andidentifiedrestrictive and

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