叶酸一脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用.pdfVIP

维普资讯 J怒S}1ahaiMedU似niv2…f】】0【 ．’27(1) 4 叶酸一脂质体制备及对 HeLa细胞靶 向作用* L／， 陆伟跃 刘 敏 潘 俊 力 弘 马 傻 (上海压科太事 ；i 所药物靶向制剂研究室．药； 磊 教研室 上海 2001132) 摘【要】 目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸一脂质体。方法 将叶酸(F)、聚己二醇二胺 (N 一PEG-NH2)、琥珀酸酐 (suc)和卵黄磷脂酰乙醇胺 (EPE)按序共价连接 ．并与胆 固醇 (chot)、卵黄磷脂酰胆 碱 (EPC)以10：40：56配比，用成膜 ·水化结合挣冻 ·熔融超声法制备内古钙黄绿素叶酸一脂质体，以负染色一电镜法 确定其粒径；用荧光显微镜观察HeLa细胞摄取叶酸I且旨质体与脂质体 的差异；以荧光定量法确定旅度 、时间、游 离 F、磷脂酶 D(PLD)和磷脂酰肌醇特异磷脂酶C(PIPLC)对 HeLa细胞摄取叶酸一脂质体影响程度。结果 (1) F·PEG-SUC-EPE连接物为色谱纯 ；叶酸一脂质体平均粒径为 200nrn。(2)叶酸 ·脂质体进人 HeLa细胞质 内量 明 显高于脂质体。(3)浓度增大 、时间延长 ．叶酸-脂质体摄取量递增幅度明显减缓；HeLa细胞摄取叶酸一脂质体量 均在脂质体 的4倍以上。(4)50~mol／L游离 F可使 叶酸一脂质体摄取量降低 50％；P1PLC(0 2U／mr)和 PLD (05rag／rrd)处理后．叶酸一脂质体摄取量分别降低 71％和 70％。结论 200nm粒径的叶酸 ·脂质体能通过细胞 膜上 F受体介导 内吞人胞 ．井能显著靶 向富集 F受体 的肿瘤细胞 。 关【键词】吐墼：塑垦堡；制备；HeLa~ ； l堑 ；靶向 【中国围书馆分类法分类号】 R962 { Preparation ofFolate-Liposomeand ItsDeliveryintoCulturedHeLaCells LU Wei．yue，LIU Min，PAN Jun，LIHong~，MAJun (DepartmentofTargatingPharmaceutical，Institute P‰ ‘c)，DepartmentofPharmacdog3． s 耐 DrF‰ m ．s n MedicalUniversity，‰ ng缸z200032) A【bstract】 marp~e Topreparefolate-liposomestargetingttmnorcellsviafolatereceptormediatedendo． cytosis． M ethods Folatepolyethyleneglym1．succiny[．eggphosphatidylethanolamine(F—PEG。SUC EPE) vcass)mthesizedbyreactingF-PEG-NH2(oonjugatepreparedby[olicacidandPEG-bis-amme)withSUC— EPE (oonjugatepreparedbysuednicanhydrideandeggphosphatidytethanolamine)Folate-l@osomesoom posde of卜PEG—SUc-EPE／choIeste∞1／eggphosphatidylcholine(10：40：56)were preparedbyrehydortionof 1ipidfilm inPBScontai