抗HEV嵌合抗体的构建及在CHO细胞中的表达.pdfVIP

第 卷 第 期 病 毒 学 报 20 4 Vol.20 No.4 2 0 0 4 年 1 2 月 C~INESE 0 RNAL 0FVIR0L0GY Dec. 2 0 0 4 抗HEV嵌合抗体的构建及在CHO细胞中的表达 罗文新，李利峰，许辰煜，程通，管宝全，张军，夏宁邵 （厦门大学 福建省医学分子病毒学研究中心，福建 厦门 361005） 摘要：通过 方法从分泌戊型肝炎（戊肝）病毒中和性鼠源单克隆抗体（单抗） 的杂交瘤细胞中克隆出 RT-PCR 8C11 抗体基因的重链可变区（ ）、轻链可变区（ ）序列，并分别克隆到含有人 重链和 轻链恒定区序列 V V amma 1 ka a ~ K g pp 的 ／ 和 （ ）质粒中，共转染中华仓鼠卵巢癌细胞（ ）细胞。 结果表明，转 cDNA3.1 ~ ro cDNA3.1 + C~0 RT-PCR p yg p 染的 细胞转录了嵌合重链及轻链基因，间接 及 结果表明：翻译出的两种多肽在细胞内正 C~0 ELISA Western blot 确组装成嵌合抗体分子，并可分泌至细胞外，表达的嵌合抗体保留了原鼠单抗的抗原结合特异性及对8~3 结合抗 原的增强作用。8C11嵌合抗体的成功表达可降低鼠源性，为探讨戊肝抗体治疗的可能性奠定了基础。 关键词：戊型肝炎病毒；嵌合抗体；真核表达 中图分类号： 文献标识码： 文献编号： （ ） R373.21 A 1000-8721 2004 04-0291-07 戊型肝炎（戊肝）流行于亚非大部分发展中国家 了其发展。而应用鼠源单抗治疗人体疾病会引起人 及中美洲墨西哥等地，是这些国家临床急性肝炎的 抗鼠抗体（ ， ）反 human anti-mouse antibod ~AMA y 一个主要起因。中国的临床急性肝炎病例有 10% 应。近年来，基于人源噬菌体抗体库技术和抗体工 ［ ］ 是由戊型肝炎病毒（ ）引起的，印度则达 程平台技术4-6 ，抗病毒感染治疗性的人源或人源 15% ~EV 50% 左右，而尼泊尔加德满都谷地更是高达 化基因工程抗体的研究已取得了很大进展，给各种 ［］ 60% 1 。临床急性戊肝的死亡率与甲型肝炎相似 病毒性传染病的特异性预防和治疗带来了新的希