复方玉泉丸保护DNA损伤有效部位研究.pdfVIP

LISHIZHENI～IEDICINEANDI~lIATERIAbtEDlCARESEARCH2009VOL．20NO．8 时珍国医国药2009年第20卷第8期 复方玉泉丸保护DNA损伤有效部位研究 吴凤琪1”，陈茂勇2，李磊幻，柳艳2，吴倩2，张良1 (1．国家海洋局第一海洋研究所，山东青岛266061； 2．南京医科大学公共卫生学院，江苏南京210029) 摘要：目的探讨复方玉泉丸保护DNA损伤活性部位及作用机制。方法用不同极性的提取剂热回流序贯提取复方玉泉 Vit rim处吸 C—H20：一DNA化学发光体系测定DNA损伤保护作用。结果各提取部位均能使DPPH自由基体系在517 光度明显降低，且在30min内持续下降。浓度为0．625 625 mg／ml时，对DNA损伤抑制率分别为84．3％，31．5％和51．5％，受损时间分别延长17．4，2．3rain和12．1min。结论 70％乙醇提取物能有效降低DNA损伤程度，并使DNA氧化损伤延迟，其机制与清除DPPH及·OH自由基活性有关。 关键词：复方玉泉丸；DNA损伤；有效部位；化学发光 中图分类号：R285．5文献标识码：B 文章编号：1008-0805(2009)08．1905-02 糖尿病是一种常见的多病因、有遗传倾向的内分泌代谢紊乱 10 ml提取液，热回流 g置于圆底烧瓶，按极性由弱到强加100 性疾病，其发病率正在逐年增长。经典的糖尿病并发症的多元醇 (温度根据提取液沸点不同而定)提取30min，过滤。将滤液在 途径、糖基化终末产物途径、蛋白激酶c途径和氨基己糖途径， 沸水浴中蒸干，称重。滤渣用另一种较高极性的提取液序列提 均是高糖环境下，线粒体呼吸链中氧自由基生成过多导致的结 取，如此反复，得不同部位提取物。用乙醇溶解定容至一定浓度 果…。由于自由基具有很高的反应活性，它将在分子、细胞乃至 作为待测液。所用提取液顺序为：石油醚、乙醚、70％乙醇、丙酮、 器官水平给机体造成损伤，诱导多种并发症旧。J。因此，在糖尿 甲醇和水。另称取两个109玉泉丸粉末分别用70％乙醇和人工 病、尤其是并发症防治中，重视体内自由基的清除和阻止自由基 胃液(pH1．2盐酸水溶液)单独提取。 引起的损伤具有十分重要的意义。 2．2 DPPH自由基清除活性称取5．9DPPH自由基，用乙醇 mg 玉泉丸是我国治疗糖尿病的中药验方，具有生津止渴、清热 溶解后定容到25ml，此为储备液。应用前稀释10倍，使其浓度 除烦、养阴滋肾、益气和中之功能，特别是在糖尿病并发症防治方 为6×10一mol／L。 ml试样(空 面疗效确切。6“1。但是，长期以来，对玉泉丸的研究和开发较少， 向1ml的6×10。mol／LDPPH溶液中加入0．1 rnl。摇匀后，测定DPPH 其降血糖作用及具有防治糖尿病并发症的物质基础不清、标准不 白用等量无水乙醇代替)，总体积为1．1 严、剂型单一。本研究针对糖尿病并发症的危害，以清除DPPH混合液在517nm处的吸光度(OD)值，每2分钟测定1次，持续测 自由基活性及防止·OH自由基引起的DNA损伤为指标，初步定30min。用1ml乙醇与0．1ml试样提取液调仪器零点，以扣除 筛选玉泉丸药效作用的有效部位，为糖尿病并发症的防治和玉泉 试样本身颜色的影响。取其第30min时的吸光度计算其清除率： 丸新剂型的开发提供参考。 清除率(％)=[(～一A样)／Ao]×100％ 1器材