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RNA病毒内部核糖体进入位点(II迮S)研究进展 赵晔张靖溥 (北京协和医学院研究生院、中国医学科学院医药生物技术研究所，北京100050) ribosome 摘要：mRNA翻译的起动有两种机制：帽结构依赖性的翻译和IRES(internalentry sites)介导的非帽结构 不同病毒的IRES在结构和功能上，既存在保守性，又有各自的特点。病毒IRES序列在病毒基因的表达、复制 和致病性上具有至关重要作用，对病毒IRES功能和调控的研究是当前病毒学研究热点之一。本文概述了近年来 RNA病毒IRES的几种分型及各自的特点以及IRES的应用。 关键词：内部核糖体进入位点(IRES)，RNA病毒，HCV，EMCV，PV，蛋白翻译 在真核细胞中存在着两种蛋白翻译起始的机制。大多数真核细胞蛋白的翻译起始依赖于对mRNA5’端 7 的帽结构(m 合1，募集核糖体亚单位与mRNA的结合，在细胞内其它翻译起始因子的参与下，起始翻译2，这种方式 称为帽结构依赖的主体翻译(cap-dependent 不需要依赖于帽结构。最早提出这一机制的是在1988年，Jang，S．K等人通过分别构建单双顺反子，在微 球菌核酸酶处理后的HeLa细胞提取物和兔网织红细胞系统中检测报告基因的表达情况，发现脑心肌炎病 构建双顺反子，发现只有当5NCR置于上游时顺反子才能被翻译，从而发现了微小核糖核酸病毒 译，证实了IRES能够起始翻译这一机制的可行性5。之后人们对这一全新的机制展开大量研究工作，从发 6，这使得IRES介导翻译的机制成为真核细胞蛋白翻译机制的重要补充。 细胞内的mRNA所包含的IRES二级结构较弱，结构的稳定性较强，推断其可能与帽依赖的翻译具有相似 的机制7。IRES在细胞应激、细胞发育及细胞疾病(如癌变等)中能够起到重要作用，例如多功能再生性 内部结合位点，推测能够保护在应激条件下细胞免于凋亡；人的微管相关蛋白tau的mRNA包含有一个 可能在维持细胞生理状态和病理进程中发挥重要作用。本文仅对RNA病毒IRES的功能及特性展开简要叙 述。 395 1．RNA病毒按照IRES的分类 1．1含有IRES的RNA病毒的宿主分布情况 1 (HRV)、人免疫缺陷病毒1型。除HTLv．1，HIVgag之外，其余均属于微小核糖核酸病毒科。除感染人 的病毒外，还在其他哺乳动物、植物、昆虫中发现了包含IRES结构的RNA病毒6。 1．2基于IRES作用机制的病毒分类 随着人们对IRES功能特点研究的不断深入，对IRES病毒出现了多种分类方式。本文概括了目前为大 多数研究者接受的分类方式，将含有IRES结构的病毒根据翻译时所需翻译起始因子的情况、IRES的二级 结构、起始密码相对于IRES的位置和在网织红细胞系统中IRES起始翻译的作用等分为四类6，13，14： 第一类病毒的IRES能够直接与核糖体亚单位结合，不需要其他蛋白因子和甲硫氨酰．tRNAi的参与， 这些病毒的RNA的结构对其功能起到决定性作用。因此，这类IRES基本能够取代参与翻译起始的蛋白因 IRES)。 类IRES被称为基因间区域IRES(IGR 第二类病毒的IRES 亚单位，起始mRNA的翻译。这类病毒例如丙型肝炎病毒(HCV)和猪瘟病毒(CSFV)。 第三类病毒IRES 这些病毒能够在网织红细胞系统中能够有效起始翻译，核糖体结合在AUG附近，无需划动，不与eIF4G 的水解产物作用，代表病毒为脑心肌炎病毒(EMCV)。 and 第四类病毒IRESRNA需要elFs，Met．tRNAiITAFs参与，不能单独在网织红细胞系统中翻译， 灰质炎病毒(Pv)和鼻病毒属(rhinovirus)。 2，IRES的结构 2．1基因间区域IRES的结构 and