骨髓干细胞的临床试验的研究.pdfVIP

2009增刊 中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHemafDlogy·321· E058 造血干细胞衰老体外模型构建及其生物学研究初探 周明 杨斌 王亚平 16 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室 重庆4000ypwangcq@yahoo．cn 背景：最新研究认为成体干细胞的衰老是生物体衰老 gal)细胞化学染色，计数阳性细胞百分比；运用逆转录聚 的根本原因，现已证明造血干细胞(HSC)衰老与机体衰合酶链反应(RT—PCR)分别检测细胞周期蛋自激酶抑制因 老密切相关。HSC衰老研究中的关键问题是HSC衰老模型的 构建，迄今还未有公认的HSC衰老的体外模型，建市HSC衰察t—BH唠导Sca—l+HSC衰老的作用。 老体外模型町为深入研究HSC衰老的生物学机理及调控机 结果：流式细胞术鉴定分选细胞的纯度达85％，免疫 制奠定基础。 荧光示大最带绿色荧光Sea—l+HSC，甲基纤维素半固体培 目的：运用i丁基过氧化氢’(t—BHP)诱导小鼠sca—l+养见大量混合集落形成。，衰老组细胞形成集落能力较对照 HSC衰老，建立HSc衰老体外模型．初步探讨其生物学机理。 组明显减弱，形成集落数明显减少；G1期细胞比例增加； 方法：本实验运用免疫磁珠分选法分离纯化小鼠 SA—B—gal染色，阳性细胞百分比显著高于对照组，提示 Sea一1+HSC，流式细胞术及免疫荧光鉴定分选细胞的纯 度，甲基纤维素半固体培养鉴定分选细胞增殖与多向分 化能力。纯化的Sca—l+HSC分为对照组：常规培养体系高于对照组。 培养；衰老组：在对照组基础上加入终浓度为100umol／L结论：运用免疫磁珠分选可分离纯化小鼠Sca—l+HSC， t-BHP作用4小时，诱导细胞衰老．对照组与衰老组细胞卜BHP能诱导小鼠Sea—l+HSC衰老，建立衰老体外模型。 转入甲基纤维素半同体培养体系培养．检测细胞自我更新 与多向分化能力；流式细胞术进行细胞周期分析，计算两 在t—BHP诱导s【铲l+HSC衰老中可能发挥重要作用。 组细胞Gl期细胞比例；衰老相关p一半乳糖苷酶(SA—B一 E059 骨髓干细胞的临床试验研究 王恒湘 空军总医院血液病中心 北京100036 wanghengxiangl23@yahoo．COill．C13 成体骨髓中含有多种干细胞．包括与造血功能有关的 下向某一特定细胞分化，完成组织修复。与其他干细胞不 stem cells，HSC)、具有成骨、同，MSCs体外增殖旺盛，在严格控制培养条件下，细胞町 造血干细胞(hematopoietic stem 成软骨和成脂肪有关的问充质干细胞(mesenehvmal扩增l亿倍。更为重要的事，在一定传代次数内，细胞仍 cells。MSCs)、与血管形成和血管新牛有关的成血管祖细胞可保留干细胞的多向分化特性：因此。MSCs具有广阔的应 用价值，是骨和软骨组织构建重要的种子细胞，也用于肝 (angioblast)以及未知功能干细胞(如成体骨髓祖细胞． adultmarrow cells。MAPC)等。目前临床上开展脏和神经组织的修复。鉴于此．美固FDA已经批准异体或 progenitor 的生物治疗项目主要涉及两类干细胞，即新鲜富集的骨髓 自体MSCs治疗骨髓移植后移植物抗宿主病、骨折后愈合 干细胞和经体外培养的自体