川芎嗪对家兔肾缺血%2f再灌注损伤所致氧化应激干预作用.pdfVIP

华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 359 川芎嗪对家兔肾缺血／再灌注损伤所致氧化应激的干预作用 毛朝呜1，陈辉乐1，金可可2，邱晓晓2，李东3方周溪4王万铁26 (温州医学院，浙江温州325035，1．附属第二医院肾内科；2．病理生理学教研室； 3．检验医学与公共卫生学院放免中心；4．电镜室) [摘要]目的观测兔肾缺血／再灌注损伤时氧化应激体系的变化、探讨中药川芎嗪注射液的干预作用 及机制。方法采用在体兔双侧’肾动脉持续性阻断1h，再灌注5h的肾缺血／再灌注损伤动物模型。日 再灌注+川芎嗪注射液组(L，z组)。各组在缺血前、缺血1h、再灌注lh、3h和5h分别经颈总动脉 力和MDA含量均随缺血和再灌注时间的延长而逐渐上升，但LZ组与IR组同时间点相比均明显降低 显高于IR组(均P0．01 芎嗪可通过降低氧自由基水平，减轻氧化应激，对肾缺血／再灌注损伤具有保护作用。 [关键词]川芎嗪；肾；缺血／再灌注损伤；黄嘌呤氧化酶；超氧化物歧化酶；丙二醛；氧化应激 ischemia 肾缺血／再灌注损伤(renal reperfusion 急性肾功能衰竭发生的重要病理生理基础，揭示其损伤的机制，寻求防治方法具有十分重要临床意义。本 研究建立兔RIRI模型，观察RIRI发生过程中氧化应激体系统的变化，以及中药川芎嗪对氧化应激体系统 影响。 1材料和方法 1．1材料 (批购自山东长富洁净药业有限公司。 1．2方法 [基金项目】浙江省教育厅科研基金资助项目 [作者简介】毛朝鸣(1960一)，男，浙江温州人，副主任医师。E．mail：maochaoming@126．com [通讯作者】王万铁，1963年，男，浙江省温州市，教授，主任医师，博士生导师，研究方向：脏器缺血／再灌注损伤的机制 研究及临床应用。E．mail：w叭@wzmc．edu．cn 360 华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 开腹膜，用血管钳拉开直径约4cm的手术视野，用湿纱布拨开肠管，暴露肾脏，用玻璃分针分离。肾动、静 脉，用无创动脉夹夹闭左、右肾动脉，阻断血流1h，达预定时间后松开动脉夹恢复血供5h。 肾动脉和恢复血流即刻，分别白耳缘静脉注射生理盐水4ml：(2)缺血／再灌注+川I芎嗪注射液组 嗪注射液(200mg／kg溶于4ml生理盐水)，其余同IR组；(3)假手术组(sham 腹后仅暴露肾脏6h，不阻断肾动脉，余同IR组。 取血，肝素钠抗凝，3500r／min低温离心15min，分离血浆，一20℃保存，待测。 实验毕，摘取双侧肾脏，取右肾适量新鲜活组织先于液氮罐中保存，后快速称取100mg，置微型匀浆 器中，加无水乙醇0．iml研磨，再加生理盐水0．9ml充分研磨制成匀浆，一20℃以下保存；测定前，4℃， 3500r／min低温离心15min，取上清，待测。 严格按试剂盒说明书操作。 1．2．4肾组织超微结构检查取2．5％戊二醛前固定的组织块，0．2M磷酸缓冲液漂洗，l％饿酸后固定lh， 812环氧树脂包埋，PT—xL型超薄切片机，醋酸双氧铀、柠檬酸铅双重染色， 乙醇丙酮系列梯度脱水，Epon H-7500型透射电镜观察、拍照。 1．3统计学处理采用SPSS11．0统计软件分析。所有数据进行正态性检验，用均数±标准差(x±s)表示。 多组样本均数比较进行方差齐性检验，组问比较、组内不同时间点比较采用单因素方差分析(one—way T3检验。 ANOVA)。方差齐者两两比较采用LSD法，方差不齐者进行Dunnet’S 2结果 力无明显变化(均P0．05)。IR组随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐升高，缺血和再灌注各时点均明显 IR组各相同时点比较显著降低(均P0．01)。见表1。 表1三组实验兔肾缺血／再灌注不同时点血浆XO活力的变化及比较 ofXOinrabbit atdif