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华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 359
川芎嗪对家兔肾缺血/再灌注损伤所致氧化应激的干预作用
毛朝呜1,陈辉乐1,金可可2,邱晓晓2,李东3方周溪4王万铁26
(温州医学院,浙江温州325035,1.附属第二医院肾内科;2.病理生理学教研室;
3.检验医学与公共卫生学院放免中心;4.电镜室)
[摘要]目的观测兔肾缺血/再灌注损伤时氧化应激体系的变化、探讨中药川芎嗪注射液的干预作用
及机制。方法采用在体兔双侧’肾动脉持续性阻断1h,再灌注5h的肾缺血/再灌注损伤动物模型。日
再灌注+川芎嗪注射液组(L,z组)。各组在缺血前、缺血1h、再灌注lh、3h和5h分别经颈总动脉
力和MDA含量均随缺血和再灌注时间的延长而逐渐上升,但LZ组与IR组同时间点相比均明显降低
显高于IR组(均P0.01
芎嗪可通过降低氧自由基水平,减轻氧化应激,对肾缺血/再灌注损伤具有保护作用。
[关键词]川芎嗪;肾;缺血/再灌注损伤;黄嘌呤氧化酶;超氧化物歧化酶;丙二醛;氧化应激
ischemia
肾缺血/再灌注损伤(renal reperfusion
急性肾功能衰竭发生的重要病理生理基础,揭示其损伤的机制,寻求防治方法具有十分重要临床意义。本
研究建立兔RIRI模型,观察RIRI发生过程中氧化应激体系统的变化,以及中药川芎嗪对氧化应激体系统
影响。
1材料和方法
1.1材料
(批购自山东长富洁净药业有限公司。
1.2方法
[基金项目】浙江省教育厅科研基金资助项目
[作者简介】毛朝鸣(1960一),男,浙江温州人,副主任医师。E.mail:maochaoming@126.com
[通讯作者】王万铁,1963年,男,浙江省温州市,教授,主任医师,博士生导师,研究方向:脏器缺血/再灌注损伤的机制
研究及临床应用。E.mail:w叭@wzmc.edu.cn
360 华东地区第十二届实验动物科学学术交流会
开腹膜,用血管钳拉开直径约4cm的手术视野,用湿纱布拨开肠管,暴露肾脏,用玻璃分针分离。肾动、静
脉,用无创动脉夹夹闭左、右肾动脉,阻断血流1h,达预定时间后松开动脉夹恢复血供5h。
肾动脉和恢复血流即刻,分别白耳缘静脉注射生理盐水4ml:(2)缺血/再灌注+川I芎嗪注射液组
嗪注射液(200mg/kg溶于4ml生理盐水),其余同IR组;(3)假手术组(sham
腹后仅暴露肾脏6h,不阻断肾动脉,余同IR组。
取血,肝素钠抗凝,3500r/min低温离心15min,分离血浆,一20℃保存,待测。
实验毕,摘取双侧肾脏,取右肾适量新鲜活组织先于液氮罐中保存,后快速称取100mg,置微型匀浆
器中,加无水乙醇0.iml研磨,再加生理盐水0.9ml充分研磨制成匀浆,一20℃以下保存;测定前,4℃,
3500r/min低温离心15min,取上清,待测。
严格按试剂盒说明书操作。
1.2.4肾组织超微结构检查取2.5%戊二醛前固定的组织块,0.2M磷酸缓冲液漂洗,l%饿酸后固定lh,
812环氧树脂包埋,PT—xL型超薄切片机,醋酸双氧铀、柠檬酸铅双重染色,
乙醇丙酮系列梯度脱水,Epon
H-7500型透射电镜观察、拍照。
1.3统计学处理采用SPSS11.0统计软件分析。所有数据进行正态性检验,用均数±标准差(x±s)表示。
多组样本均数比较进行方差齐性检验,组问比较、组内不同时间点比较采用单因素方差分析(one—way
T3检验。
ANOVA)。方差齐者两两比较采用LSD法,方差不齐者进行Dunnet’S
2结果
力无明显变化(均P0.05)。IR组随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐升高,缺血和再灌注各时点均明显
IR组各相同时点比较显著降低(均P0.01)。见表1。
表1三组实验兔肾缺血/再灌注不同时点血浆XO活力的变化及比较
ofXOinrabbit atdif
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