洛菲不动杆菌分离鉴定及序列分析.pdfVIP

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会论文集 洛菲不动杆菌的分离鉴定及序列分析 吴彩艳，威南山，廖申权，吕敏娜，孙铭飞+ 510640) (广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室，广坍’I 摘要：从鸭肝脏中分离l株革兰氏阴性球杆样细菌KP进行研究，利用培养特性、生化特性进行初步鉴 定，通过16SrRNA基因分析及序列比对明确其种类来源及亲缘关系；以21种抗菌药物进行药敏试验仅对丁胺 卡那霉素和庆大霉素敏感，对其余19种药物全部耐药；利用BLAST进行序列比对该菌与洛菲不动杆菌的相似度 为99％，根据表型形状和种系发生结果证实该茵为洛菲不动杆菌，此研究为洛菲不动杆菌首次在鸭中发现。 rRNA 关键词：鸭；洛菲不动杆菌；16S 采集肝脏等病料。 不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是条件性致病 菌，当机体抵抗力降低时易引起机体感染，是引起 1。2试剂及培养基TSA、麦康凯培养基按细菌 医院内病人感染的重要机会致病菌之一。该菌属有 学常规方法配制；微量生化发酵管购自广东环凯生 30多个种，临床上常见鲍曼不动杆菌感染，其中以 物科技有限公司；Premix 硝酸钙阴性不动杆菌(A．anitratus))及洛菲不动杆菌(A． 1woffi)的致病性较强…。该菌可引起呼吸道感染、败 血症、脑膜炎、心内膜炎、伤口及皮肤感染、泌尿 GGAGGTGATCCAGCCGCA．．3，由广州英俊生物 生殖道感染等。不动杆菌广泛分布于外界环境中， 技术工程公司合成。 主要在水体和土壤中，易在潮湿环境中生存，该菌 药敏纸片：购自杭州微生物试剂有限公司，药 粘附力极强，易在各类医用材料上粘附，而可能成 物种类包括：链霉素、氧氟沙星、红霉素、头孢三 为贮菌源。此外，本菌还存在于健康人皮肤、咽 嗪、头 部、结膜、唾液、胃肠道及阴道分泌物中，通过接 孢噻肟、强力霉素、复方新诺明、阿莫西林、 触和空气传播【2】。对于该菌引起疾病的防治，广谱 丁胺卡那霉素、痢特灵、氨苄青霉素、恩诺沙星、 抗生素的广泛使用是其重要手段之一。但是，临床 四环素、氯霉素、头孢噻吩、阿奇霉素、青霉素、 治疗中滥用抗生素现象非常普遍，在抗生素的强大 庆大霉素、环丙沙星、氟苯尼考、痢特灵。 压力下，不可避免地产生大量耐药菌株，这些耐药 1．4病原的分离与鉴定 菌株已成为当代医院感染的棘手问题[3】。本研究首 1．4．1病原的分离无菌取肝脏分别划线接种麦康 rRNA凯平板与TSA平板，37℃过夜培养，对菌落形态 次从病鸭体内分到一株不动杆菌，通过16S 基因测序比对分析该菌为洛菲不动杆菌，现将该菌 进行观察。革兰氏染色，镜检后，挑取单个可疑菌 的分离培养、药敏试验及序列比对分析报告如下。 落进行纯培养。 1．4．2 生化试验将分离株纯培养物分别接种乳 1 材料和方法 糖、麦芽糖、甘露醇、木糖、棉予糖、山梨醇、蔗 糖、阿拉伯糖，并进行硫化氢试验、VP试验、甲 基红试验，氧化酶试验、吲哚试验、硝酸盐还原试 1．1病料样本病料采自广东省开平某鸭场，无菌 作者简介：吴彩艳，女，内蒙古赤峰人，硕士，主要从事鸡球虫病及坏死性肠炎研究 }通讯作者：E．mail：smfei7810@yahoo．tom．Crl