薄层色谱法测定抗炎灵口服液中连翘甙的含量.pdfVIP

TLC．003 薄层色谱法测定抗炎灵口服液中连翘甙的含量 罗健邹金蕾黎新荣1张学新2 (广东药学院药物研究所广州510224) (广州市红十字会医院广州 510000)2(广东省政府机关门诊部广州510000) 1前言 抗炎灵口服液是医院自制的新制剂，它由连翘、金银花、黄芩等6味药材组成．临床 用于清热解毒、抗菌消炎、抗病毒等，服用方便，效果良好”1。中国药典(1995年版)采用 高效液相色谱法测定其它连翘制剂中连翘甙含量嘲，成本较高，不适于广泛推广应用。至 今该口服液制剂仍未有定性鉴别方法和定量化质量标准方法‘”。本文采用薄层扫描法测定 抗炎灵口服液中连翘甙含量”’l。方法简便，结果准确，可作为该制剂的质量控制标准。 2仪器与试药 2．1仪器 层自动铺扳器(PBQ-II型，重庆南岸新力电器厂)。 2．2试药 硅胶G(青岛海洋化工厂，薄层用，10~40um)，连翘甙标准品(中国药品生物制品检 定所)，抗炎灵口服液(广州市红十字会医院)，聚酰胺粉(广州化学试剂厂，14~30目)， 中性氧化铝(上海五四化学试剂厂，层析用100也00目)，其余所用试剂均为AR级。 3方法与结果 3．1薄层板的制备 称取适量硅胶G，与0．3％cMc．Na溶液以l：2．2混合，研匀，铺成0．4mm厚度薄层 板晾干，在105℃下活化lh，置干燥器中备用。展开剂配制：环己烷-氯仿．苯．甲醇 (5：3：5：3)。显色剂：l帆硫酸乙醇液，在J05℃下烘约50min，至出现明显紫褐色斑点 即可。 3．2薄层扫描条件 方式反射法双波长锯齿扫描；测定波长^i_510nIn，参比波长_l-700锄；扫描速度 20mm／min：灵敏度×2。 3．3标准曲线绘制 精确称取连翘甙标准品2．2lmg，用乙醇溶解并定容至2．OmL，即制成质量浓度为 1．119几的标准溶液。用定量点样毛细管分别吸取连翘甙标准液1．O，2．o，4．o，6．0，8．O。 12．O，16．o uL点于同一硅胶G板上。按上述方法展开，扫描测定，以斑点峰面积积分值 为纵座标，点样量为横座标，制得一条不通过原点的标准曲线。连翘甙在1．1l～17．76ug之 间呈良好线性关系，回归方程y_劬．147＆x-+1．4603．相关系数，=0．9910。 3．4精密度测试 分别吸取连翘甙标准液10uL，点于同一薄层板上，共5点。依上述方法展开。扫描 测定，RsD=1．02％(F5)，精密度良好。 ．752． 3 5稳定性测试 吸取连翘甙标准液louL，点于薄层板上。按上述方法展开，显色，每间隔一定时间 扫描一次，报告结果证明在4h内稳定，RsD=o．10％“=12)。 36样品含量测定 准确量取50mL抗炎灵口服液，用水饱和的正丁醇50mL萃取3次。合并上层液，用 50mL水洗2次，水浴蒸干得残渣。加少量乙醇溶解，加至聚酰胺(1轧30目)吸附柱上。 用约300mL水洗至无色，再用约140mL的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干。残渣 用少量50％乙醇溶解，再加至中性氧化铝(10肛200目)柱上，用50％乙醇洗脱至无色。合 并洗脱，水浴蒸干，乙醇溶解并定容至 10mL。制成样品溶液． 用定量点样毛细管分别吸取样品液 15 uL、标准液1．0ⅡL及3．ouL，点于 硅胶G板上。按上述薄层条件展开，显 色，扫描测定。依据外标二点法公式计算， 得抗炎灵口服液中连翘甙含量。结果见表 l。 表2连翘甙回收率测定结果(F5) 3．7回收率试验 编号肾鬻搿～篇 精确量取抗炎灵口服液50mL，准 !坐! !竖! !型 !型 l 510 4．86 95．30 确加入连翘甙标准品5．10mg。按2．6 2 5lO 4．90 96．08 项方法制备测定溶液，再按上述条件展 3 5．10 4．78 93．72 95．18 1．22 开、显色、扫描测定，结果见表2。