白介素1-beta转化酶抑制剂的高通量筛选.pdfVIP

着积极重要的意义，若推广将产生较大的社会效益与经济效益。 本项科研究成果的创新点与特点： (1)在国际上较早研究了现代康复+传统康复+家庭康复的中西医结合家庭康复模式， 效果优于国内外同类技术；有效率80．4％，对照组32％，PO．01。为脑瘫患者家庭节约了较 大的医疗费用，且能稳步促进脑瘫患儿语言、运动、智力发育，收到良好的社会效益。为我 国的脑瘫康复首创了既有效又经济、符合国情的新模式!具有较高的实用价值和应用价值。 该模式在促进瘫痪肢体功能恢复的同时，还可促进智力、认知、语言的恢复，这是英国较先 进Bobath法、NOT法、SPR手术、BTX—A注射疗法所不能达到的一个特点。 (2)经基础及临床研究，在国际上较早提出脑瘫患儿的“脑微循环障碍学说理论”， 文献检索结果为国内外首次报道。 (3)在国际上率先报道了该康复模式使脑瘫患儿大脑萎缩、脑发育不良恢复率达25．996， 明显高于康复训练组的2．56％，PO．001。研究证实中西医结合家庭康复可促进患儿的脑发育 及神经细胞的功能重组。 (4)在国内率先开展了小儿脑瘫的家庭康复，经多年的研究，找到了经济实用、可操 作、有效的脑瘫家庭康复适宜技术，创立了家庭康复新模式，编辑出版了配套“实用、有效、 简单易操作”的可读可视的家庭康复系列教材：《让脑性瘫痪儿童拥有幸福人生》、《脑瘫家 庭康复手册》；《小儿脑瘫家庭康复训练VCD》、《小儿脑瘫家庭康复按摩VCD》；研制发明了“脑 瘫舒筋活络按摩油”，该家庭康复模式做到了实用有效及科学规范。易于推广，经检索属国 内首创。 白介素1一beta转化酶抑制剂的高通量筛选 苏培瑜1’2，杨洪军2，李韶菁2 (1．河北大学药学院，河北保定071002； 00) 2．中国中医科学院中药研究所，北京1007 1前言 白介素1-beta转化酶(IL．1Bcoveningenzyme，ICE)是一种ASP．特异性的半胱氨酸蛋白 活性的IL．1∥】．f31。活化的IL．1p与急、慢性炎症、感染性休克和其他一些生理条件下的发 达到降低炎症反应，缓解或治疗疾病的目的。ICE抑制剂能够减少这类疾病中IL．1B的生成， 故而，ICE抑制剂(ICEInhibitor，ICEI)的开发具有重要的治疗学意义。事实上，在急性 炎症模型中ICE抑制剂已显示出抗炎作用，提示我们ICE抑制剂可能会成为有前途的抗炎 药【51。 为了寻找新的抗炎新药或先导化合物，本实验建立了一个快速的高通量ICE抑制剂筛 选方法，从大量土壤真菌代谢产物中筛选ICE抑制剂，筛选得到阳性菌株LXl986。本文报 道了其发酵、活性化合物的分离和结构鉴定，并对其进行了初步的药理毒理学研究。 2材料与方法 2．1细胞株 Culture THP．1细胞，购自American Type Collection(ATCC) 2．2菌株 ICEI刚，由本实验室提供：真菌菌株 大肠杆菌BL2l(DE3)中引入已构建好的质粒pET32a 从云南、四川和广西采集的土壤中分离得到。 2．3实验药品与试剂 assaybuffer 试剂盒(Biotec公司)。 2．4实验仪器 TH—C一1台式冷冻恒温振荡器(购自太仓实验设备厂)；超声破细胞粉碎机(Bandelin M5 Sonopuls)；Allegra…X．22RCentrifuge(BECKMANCOULER)：酶标仪SpectraMax (Molecular (Inova)：质谱仪(Micromass。Waters公司)。 2．5实验方法 2．5．1ICE在菌株中诱导表达 将已冻存菌株(15％甘油，．80℃冻存)涂布于氨苄抗性的LB平板，37℃诱导培养过夜， 挑取抗性单克隆于5mILB液体培养基中，37℃恒温振荡，200r