肝细胞特异性敲除Dicer+小鼠肝脏中细胞色素P450+酶的异常表达.pdfVIP

Dicer P450 Dicer P450 肝细胞特异性敲除DDiicceerr 小鼠肝脏中细胞色素PP445500酶的异常表达 苗玲玲，任进（中科院上海药物研究所药物安全评价研究中心，上海201203） 摘要：目的 研究肝细胞特异性敲除Dicer小鼠肝脏中细胞色素P450酶(CYP)的表达变化， 发现可能被microRNA 调控的CYP, 进而研究microRNA 对于CYP 相关生理或病理过程的 影响。方法 Albpromoter-drivenCrerecombinase 转基因小鼠与含FloxedalleleofDicer的小 鼠杂交得到肝细胞特异性敲除Dicer的小鼠。取3,4,5,6周龄小鼠肝脏，匀浆后提取蛋白质或 抽提总RNA 进行相关实验。人肝癌细胞系PLC/PRF/5 中用基因沉默的方法敲减DICER后, 检测CYP的表达变化。 结果 Cyp2e1在所检测各年龄段肝细胞特异性敲除Dicer小鼠肝脏 中表达均下调，而Cyp1a2 和Cyp3a11 仅在5-6周龄肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表 达下调，Cyp2b10 在5-6 周龄肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达上调。人肝癌细胞 PLC/PRF/5 中DICER 基因沉默后CYP2E1 表达下调。结论 DICER 表达下调后几种CYP 表达均有不同程度变化，体内外结果均显示CYP2E1表达被下调，因DICER是microRNA 成 熟过程中重要的核酸内切酶，故而CYP2E1 基因表达可能受到microRNA 调控。CYP2E1 是肝脏内重要的代谢酶，乙醇对CYP2E1的诱导是酒精致肝毒性的重要环节，CYP2E1的表 达量和肿瘤易感性、糖尿病等也密切相关。microRNA可能成为CYP2E1的重要调节因素， 从而参与到CYP2E1相关的生理或病理过程。 关键词：Dicer,CYP,MicroRNA AlteredCytochromeP450ExpressioninHepatocyte-specificDicerKnockout AlteredCytochromeP450ExpressioninHepatocyte-specificDicerKnockout AAlltteerreeddCCyyttoocchhrroommeePP445500EExxpprreessssiioonniinnHHeeppaattooccyyttee--ssppeecciiffiiccDDiicceerrKKnnoocckkoouutt MouseLivers MouseLivers MMoouusseeLLiivveerrss Lingling Miao,Jin Ren (Center for Drug Safety Evaluation and Research,State Key Laboratory of New Drug Research, Shanghai Institute of Materia Medica, Shanghai Institutes for Biological Sciences,ChineseAcademyofSciences,Shanghai201203) ABSTRACT ABSTRACT AABBSSTTRRAACCTT OBJECTIVE OBJECTIVE OOBBJJEECCTTIIVVEE CYP enzymes exhibit high interindividual variability that is not completely explained by known environmental and genetic factors. To further understand this variability, we hypothesized that microRNAs may regulate CYP expression and use hepatocyte-specific Dicer knockoutmiceasamodeltoinvestigatethepotenti