大黄对大鼠肝组织的“双向”作用%3a基于病理毒理学的比较研究.pdfVIP

大黄对大鼠肝组织的“双向”作用：基于病理毒理学的比较研究 王艳辉1,2 王伽伯1赵海平1,3，赵艳玲1， 肖小河1 中作者单位一=解放军第三○二医院/全军中药研究所北京100039 中作者单位二=湖南中医药大学 湖南 410007 中作才单位三=江西中医学院 江西 330004 [摘要] 目的：研究热大黄药效与毒性的关系，探索建立中药量-效关系的中药评价研究模式和方法，探讨熟大黄炮制 减毒韵客观真实性及其保肝与损肝的“双向”作用.方法:同时采用正常和病理动物，在较大剂量范围(2.0，5.4，14.7， 40.0g生药/kg/day)考察熟大黄总提物对实验动物一般状态、生化指标和组织病理的影响，并通过因子分析方法综合 分析熟大黄药效与毒性的关系.结果:采用主成分分析法从9个生化指标中抽提出2个公因子，共解释了原始数据 86.545％的信息.公因子1主要由TBIL、HA、LN和TGF-β1主导，可解释为纤维化因子;公因子2主要由ALT、AST 和ALP主导，可解释为细胞损伤因子.熟大黄对肝脏存在明显的药效与毒性 “双向”作用：对CCl4诱导的慢性肝损 伤具有显著的保护作用，而对正常动物具有一定的肝毒性作用.病理检查结果与因子分析结果一致.结论：熟大黄对 正常动物具有一定的肝毒性作用，但用于肝损伤动物具有显著的治疗作用；基于病理毒理学的中药药效和毒性关系研 究模式及方法，阐明熟大黄药效与毒性的关系及其影响因素，阐明熟大黄炮制减毒的客观真实性及不同生理状态下大 黄保肝与损肝的 “双向作用”. [关键词] 熟大黄；病理毒理学；双向作用；因子分析；炮制减毒增效 转化医学与中药现代化高峰论坛(2012) 2h：12h 明暗周期，并定期消毒。 大黄购于甘肃省陇南地区礼县，经解放军第三0二医院中药研究所肖小河研究员鉴定为蓼科植 L．的干燥根及根茎，由北京仟草中药饮片有限公司加工炮制为熟大黄。 物掌叶大黄Rheumpalmatum 熟大黄总提取物制备：取一定量熟大黄加6倍量90％乙醇，加热提取3次，lh／次。取醇提残渣，加 10倍量水，加热提取lh。合并滤液，喷雾干燥制成粉末保存备用。 海核所日环光电仪器有限公司)；余生化免疫指标由解放军--0医院检验科协助检测，其它试剂均 为分析纯。 一 2．实验方法 2．1．实验分组、造模及给药 ①分组 以临床常用偏高剂量、前期研究上限剂量为最小、最大剂量，等比设定四个剂量组(2．0， 5．4，14．7，40．0 g生药／kg)。将动物预养l周后，随机分为lO组，每组18只，早8各半：空白组(N)、 (MPD4)。 体重，称重1次，周，按实际体重调整剂量，持续12周。 ③给药以上各给药组均自模型复制4周末开始灌胃给药至16周末，1次／d，6d／周，20ml／kg 体重，空白组与模型组给予等体积生理盐水，称重1次／周，按实际体重调整剂量。 2．2．生化指标测定 在给药第16周末，每组随机抽取lO只大鼠，早8各半，股动脉取血，离心后按说明书要求测定血 素氮(BUN)、肌酐(CREA)、转化生长因子(TGF—p1)。 2．3．组织病理检测 实验结束后处死动物，剖腹取肝脏，冰生理盐水清洗血迹，滤纸吸尽表面水分，精确称重，切 取左叶肝脏固定于10％福尔马林液中常规脱水、石蜡包埋、切片、HE染色、光镜下观察。 2．4．统计学方法 为从整体层面综合体现熟大黄的药效与毒性“双向作用”，本文采用因子分析(FactorAnalysis) 对实验检测的生化指标进行多元统计分析【201。因子分析是研究从变量群中提取共性因子的统计技术， 是主成分分析的推广和发展，也是多元统计中处理降维的一种方法。其主要目的是用来描述隐藏在 多变量中找出隐藏的具有代表性的因子，将相同本质的变量归入一个因子，可减少变量的数目，帮 助分析者