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第四章 其他切片法 44.11 滑动切片滑动切片 切片用具切片用具：滑动切片机。 优点优点：切片厚度较薄切片厚度较薄， 20～40微米，且厚度均匀。 主要用于较硬的材料，必须 经过软过软化处处理；；如用用于柔软柔软 材料，必须进行假包埋或夹 在夹持物中。 滑动切片实例—杨树茎切片 （一）材料的软化处理 取材取材：秋季取秋季取22～～33年生年生，直径直径55～～1010毫米的杨树茎毫米的杨树茎， 将其切成20～30毫米的小段； 固定：用FAA液固定24小时，可在此液中保存； 软化软化：：将固定好的杨树茎小段放入甘油将固定好的杨树茎小段放入甘油－－酒精软化酒精软化 剂中浸泡，一般需1周－1个月。坚硬的材料用氢氟酸 软化剂软化剂。 （二）滑动切片机切片步骤 夹物——按刀——切片厚度的调节——切片——选 切片切片——染色染色——脱水脱水——复染复染、分色分色——脱水透脱水透 明——封固 44.22 火棉胶切片火棉胶切片 包埋物包埋物：火棉胶火棉胶 （（celloidin)celloidin) 。 优点：能弥补石蜡切片的不足，不适宜用石蜡包 埋的材料都可用火棉胶包埋埋的材料都可用火棉胶包埋，而且组织收缩较少而且组织收缩较少。 步骤简单。 适合于脑、腱、眼球等组织。 缺点缺点：：浸胶与包埋所需时间较长浸胶与包埋所需时间较长，，切片较厚切片较厚 （20～40微米），而且不易制成连续切片。 44.22.11 火棉胶特性火棉胶特性 硝化纤维硝化纤维；； 易燃不易爆，易溶于丙酮、丁香油、苯甲酸甲酯、 醋酸丁酯及无水酒精与乙醚的混合液醋酸丁酯及无水酒精与乙醚的混合液。遇氯仿变遇氯仿变 硬，遇水变成乳白色，不溶于氯仿与酒精混合液。 遇甲醛变硬不能再溶解遇甲醛变硬不能再溶解。。 一般用法：以无水酒精与乙醚等量混合液为溶剂， 以火棉胶为溶质以火棉胶为溶质，，配成配成44 ％、％、66 ％、％、88 ％％及及1212％％溶溶 液（注意密封）。 不能直接包埋苦味酸固定的组织不能直接包埋苦味酸固定的组织，苦味酸软化火苦味酸软化火 棉胶。 44.22.22 火棉胶切片程序火棉胶切片程序 取材取材、、固定固定、、冲洗冲洗、、脱水脱水、、浸胶浸胶、、包埋包埋、、修块修块、、 切片、贴片、染色和封片。 脱水：将材料从固定液中取出，经梯度酒精脱水， 每级需1～2天。而后入1/2纯酒精与1/2乙醚混合液中 浸1～2天。 浸胶浸胶：脱水后可直接依次浸入配好的脱水后可直接依次浸入配好的66 ％％、88 ％％、 10％、12％、16％、18％各级火棉胶溶液，每级需 浸透浸透66～88天天。 浸透时间：根据材料大小和厚薄而定。5毫米厚的 组织块需1～2周，大块脑组织需1～2月。 包埋 一般包埋法：放入18％火棉胶溶液中包埋，让酒 精精和乙醚慢慢挥发醚慢慢挥发，一般需般需2～3周周；； 快速包埋法：可加少量氯仿，加速硬化。火棉胶 溶液只能浸透组织块的表层溶液只能浸透组织块的表层； 火棉胶－石蜡双重包埋法：先用火棉胶包埋再用石 蜡包埋蜡包埋，此法适于包埋柔软易脆裂的此法适于包埋柔软易脆裂的腺体组织腺体组织。 修块修块：材料从包埋盒中取出，用刀片修理平整， 使材料周围保留3～6毫米宽的火棉胶。修好后放入 70 ％酒精保存存，有有继续硬化化火棉胶棉胶的作作用。85 ％的 酒精则有软化火棉胶的作用。 切片切片： • 粘木块：修整好的火棉胶组织块底部浸入6 ％的火 棉胶溶液棉胶溶液22～33分钟分钟，在干燥木块上滴几滴浓火棉胶在干燥木块上滴几滴浓火棉胶 溶液，将组织块和木块互相接触，经2～3小时才能 硬化硬化；； • 用滑走切片机切片； • 切片放入切片放入7070 ％％酒精中酒精中。 贴片贴片:: • 蛋白甘油贴片法 • 明胶贴片法 • 火棉胶贴片法火棉胶贴片法：：11％％火棉胶滴在干净的载玻片上火棉胶滴在干净的载玻片上，， 使成薄膜，将切片从70 ％酒精中移至薄膜上，用 滤纸吸干酒精滤纸吸干酒精，，再加再加一滴滴11％％火棉胶火棉胶。。 染色:天然染料易使火棉胶染色均匀，可用H.E法 染色。人工染料易着色深，不易观察。 44.33 冷冻切片冷冻切片 （（ffrozen secti