薄层色谱-荧光熄灭法测定红古豆碱的含量.pdfVIP

第十届伞国有机分析学术研讨会 薄层色谱一荧光熄灭法爨嶂红古豆碱的畲薰： 程存归“ 夏j恨基“李秀华‘ (‘浙江师范大学化学系．金毕3210046浙江奥托康制药集团股份有限公司．金华321(104 黑龙江农睦师专化学系。阿城150300) 关键词 红古豆碱 荧光熄灭法 薄层色谱法 · 摘要 本文报道了以乙酸(9一二羧基a一甲箍)乙烯酯作为荧光剂，与红古豆碱结合后产生 xio6～2 荧光定量熄灭，从而测定红古豆碱的含量。测定结果其线性范围为2 X旧’g，7ml，最低检 测限为1．4：10“g／’ml，采用薄层色谱一荧光熄灭法测定堇窭中红豆古碱的含量为o．01‘*。 ￡ 红吉豆碱是一生物碱，存在于自然界的很多植物资源中，莨菪提取莨菪碱后的母液含有 一定量的红古豆碱。据国内研究资料显示，红古豆碱是合成药物红占豆醇酯的原：料，它具有舒 张平滑肌作用，能对抗乙酰胆碱所引起的肠痉挛，适用于解痉止痛、胃溃疡及失眠症等…。对 红古豆碱的测定，至今没有一个理想的方法，一般用中和法、安培滴定法、比色法、薄层扫描 法憎1。本文根据丙二酸与醋酐缩合，能产生一种荧光物质乙酸(B一二羧基a一甲基)乙烯酯 (简称M从试剂)…’。当叔胺类物质与荧光试剂结合时，则产生荧光熄灭现象。红古豆碱为叔 胺类生物碱，与荧光试剂结合后产生荧光定量熄灭，达到用荧光熄灭法测定红占豆碱的目的。 1仪器与试剂 氯仿等试剂(浙江龙游化工试剂厂)：．红古豆碱标准品(中国药品生物制品检定所)：莨菪(金华 市医药公司提供)。 2实验方法 2．1取一定量的丙二酸和醋酐。在一定温度一F,办II热缩合成M从荧光试剂。 5ml u 冷却，析出结晶后的母液用微量注射器准确吸取50 l母液于硅胶G薄板上，以氯仿、甲醇、 浓氨水(5：0．6：0．2)为展开剂，用标准品点样对照，用碘蒸气显色。刮取Rf值与标准品相等的 斑点，用苯进行萃取，以乙醇溶解残渣后，待测。 - 为470nm的条件F测定荧光值，以此为空白：芡光值，再同法测定样品的荧光值，求取荧光熄 灭值。绘制：】：作曲线，求取样品含量。 t 3结果与讨论 由于红古豆碱的结构无共轭双键，几乎无荧光，因此不同的荧光剂与之结合会产生不同 的效果。我们采用8一羟基喹啉-5-磺酸作为荧光剂，虽有荧光但无定量关系：采川_二甲酚橙无 荧光产生：采用荧光素钠虽有荧光但二干：扰太大。 F35 第十届全国有机分析学术研讨会 丙二酸与醋酐可以发生分子间脱水成为具有p一c，兀-7c共轭结构的荧光的荧光分子乙酸 (§一二羧基一a一甲基)乙烯醢。当红古豆碱分子中叔胺与其结合时生成季铵盐，改变了原荧 光分子的电子平衡状态，因此发生荧光熄灭，其熄灭程度与红古豆碱浓度呈线性关系。 本文选用2×10-9 g／ml标准溶液，按实验方法连续测试lO次，在可信概率为20内时， 其相对标准偏差RSD为0．04％：最低检测限为DL=1．4×lO—11g／ml。 样品中红古豆碱的含量测定值为0．01％。 参考文献 l ‘中草药化学编写组缉．中草药化学．南京：江苏科学技术出版社，1987：81 2 沙石炎等螭著．中草药有效成分分析法．北京：人民卫生出簸社，L985：[36 3 1)：865 11姗∞^．D．