酸胁迫作用下悬浮培养红豆杉细胞磁场生物学效应.pdfVIP

维普资讯 第 5卷第 3期 过 程 工 程 学 报 、，01．5NO．3 2005年 6月 TheChineseJournalofProcessEngnieering June2oo5 酸胁迫作用下悬浮培养红豆杉细胞的磁场生物学效应 范 寰， 商桂敏， 元英进 (天津大学化工学院制药工程系，天津 300072) 摘 要：研究了直流稳恒磁场对酸胁迫作用下悬浮培养南方红豆杉细胞生长和代谢的影响．结果表明，磁场提高了红 豆杉细胞的抗酸胁迫能力，细胞活力上升，生物量和蛋 白含量 明显升高，胞外多酚氧化酶(PPO)活力升高，酚类物质 积累受到抑制．在一定浓度 的盐酸作用下细胞受到的酸胁迫越大，磁场 的生物学效应越明显．胞外 pH 值和 电导率的 变化说明磁场提高细胞抗酸胁迫的能力与其加速 了物质的跨膜转运有关． 关键词：直流稳恒磁场 ；南方红豆杉细胞：酸胁迫；跨膜运输 中图分类号：Q64 文献标识码 ：A 文章编号：1009—606X(2005)03-0345—04 1 前 言 (CA)1g／L、蔗糖 30g／L]’】继代培养 5代 以上作为细胞 种子．将细胞种子 1g接种于装有25mL新鲜培养液的 红豆杉细胞悬浮培养生产具有独特抗癌活性的药 100mL三角瓶中作为实验材料．在细胞生长的第 10天 物一紫杉醇是解决其药源危机的重要手段，成为近年来 加入不 同量的浓度为 1mol／L的盐酸溶液，并将其放入 国内外研究的热点l【】．但在红豆杉细胞培养过程中存在 磁场(--3．5mT)中，同时以未加盐酸溶液的同批细胞为 很多问题，从而导致其工业化生产 的困难 ，其中一点就 空 白对照，在放入磁场后 0，2，4，6，8d取样检测． 是细胞对外界环境的敏感性．外界环境的改变会导致细 盐酸用量的选择：由预实验发现，当盐酸用量20 胞生长、代谢发生明显变化．例如，0．16Pa的剪切应力 L时，细胞活力下降较为显著．当盐酸用量50p．L时 下红豆杉细胞生长 良好，当剪切应力升高至0．78Pa时， 细胞无活力．因此，选择的盐酸用量分别为 20p．L(Low 细胞活性快速下降，剪切对细胞造成明显损伤 2【】．细胞 HC1)和 50 L(HighHC1)． 培养液中加入过量酸性物质，会导致细胞生长状态恶 2．2磁场装置 化，生物量大幅度降低．因此，提高细胞的抗逆性对于 本实验采用 自制磁场装置，主要 由螺线管、屏蔽罩、 植物细胞的大规模培养具有重要意义3【．4】． 调压器和整流器组成．其中螺线管直径 20cm，高 25 人们在研究磁场促进生长的同时，发现磁场可提高 cm，漆包铜线直径0．59mm．接入 220V，50Hz交流电， 植物的抗逆性．夏丽华等 5【】研究了磁场对羊草种子萌发