支化聚乙烯亚胺键合开管柱的制备及其毛细管电色谱性能的研究.pdfVIP

支化聚乙烯亚胺键合开管柱的制备及其 毛细管电色谱性能研究 张晓伟，杨娟。林旭聪。谢增鸿。 (福州大学食品安全与环境监测技术研究所，福州350108) 摘要：采用共价键合方法，制备了支化聚乙烯亚胺修饰的新型毛细管开管柱，并对其电色谱性 能进行了详细研究。结果表明：所制备的修饰固定相，兼具接枝聚合立体构型和丰富的支化高聚物 位点，柱内壁均匀分布大量聚合物褶皱层，柱表面积明显增加，加强了溶质与固定相作用。当流动 相pH值低于7．5时，所制备的固定相可获得反向电渗流，柱重现性好(相对标准偏差小于4．8％)， 蛋白质在该柱上得到成功分离，没有严重拖尾；多种芳香酸在8min内实现高效分离，柱效范围 86000--203000 ’ plates·m-1。 关键词：支化聚乙烯亚胺；开管柱；毛细管电色谱 中图分类号：0657。8 文献标志码：A 文章编号：1001-4020(2011)增刊-0020-02 毛细管电色谱是近年发展起来的一种高效、快 1试验部分 速的新型色谱微分离技术。毛细管分离柱是电色谱 的核心，开管柱作为毛细管柱主要类型之一，与填充 l-l仪器与试剂 柱相比它无需制备塞子，与整体柱相比它无需精确 开管毛细管电色谱仪(实验室自组装)；毛细管 优化聚合物和致孔剂的混合比例，具有制备简单、易 柱(总长65ClTI，有效长度38cm，内径50肛m)。 操作，柱效高的优点[1-3]。但由于开管柱内有效键合 乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯，水为二次蒸 官能团的柱表面积较小，存在相比较低、柱容量较小 馏水。 的问题。探索增加相比或表面积的制备方法是目前 1．2仪器工作条件 开管固定相研究的重点[4]。 分离电压为--18kV；流动相为：①pH4．5的 20 支化聚乙烯亚胺(PEI)是一种具有伯胺、仲胺 mmol·L_1磷酸盐缓冲溶液与乙腈按体积比80 和叔胺的支链阳离子高聚物，可进行多种化学改性， 比20的混合溶液(分离蛋白质)，②pH4．5的 是性能优良的修饰材料。PEI作为吸附涂层已用于 20 mmol·L-1磷酸盐缓冲溶液与乙腈按体积比75 毛细管电泳物理涂层修饰研究，修饰操作较为耗时 比25的混合溶液(分离芳香酸)，每次更换流动相需 且重现性不佳[5I。在电色谱技术领域，PEI的研究用新的流动相平衡15min；柱温为室温(25oC)，检 nm。 尚未开始。本工作基于毛细管内壁乙烯基化、环氧 测波长为214 基团柱内接枝反应，共价键合PEI增加柱表面积， 1．3开管柱制备 制备一种新型电色谱开管柱，并将其用于蛋白质和 毛细管柱内壁首先乙烯基化处理。接着将溶解 芳香酸的分离。 有0．75 g·I。_引发剂偶氮二异丁腈A1BN和10％ (体积分数，下同)单体甲基丙烯酸缩水甘油酯 收祷日期：2011-03—28 (GMA)的甲苯溶液注入毛细管中，于80。C反应 基金项目：国家自然科学基金20907009) 7h，进行GMA接枝聚合。最后，注入溶解于 作者简介：张晓伟(1982一)，山东东营人，博士研究生，主要从